2016 02-22

基因克隆的載體

基因克隆的本質(zhì)是使目的基因在特定的條件下得到擴(kuò)增和表達(dá)，而目的基因本身無法進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)、不易進(jìn)入受體細(xì)胞、不能穩(wěn)定維持，所以就必須借助于“載體”及其“寄主細(xì)胞”來實(shí)現(xiàn)。作為基因克隆的載體必須具備以下...

2016 02-19

限制性核酸內(nèi)切酶及其應(yīng)用

限制性核酸內(nèi)切酶及其應(yīng)用（一）限制性核酸內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)當(dāng)λ(k)噬菌體侵染E.coliB時，由于其DNA中有EcoB核酸酶特異識別的堿基序列，被降解掉。而E.coliB的DNA中雖然也存在這種特異序列，...

2016 02-17

輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)石蠟切片法

組織經(jīng)石蠟包埋后制成的蠟塊，用切片機(jī)制成切片的過程為石蠟切片法。石蠟切片法現(xiàn)使用的切片機(jī)有*、輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)兩種。ELISA試劑盒輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)石蠟切片法1．切片前的準(zhǔn)備：清洗過的載玻片、毛筆、鉛筆、盛有...

2016 02-15

中樞免疫器官與外周免疫器官

根據(jù)免疫器官在免疫細(xì)胞發(fā)育成熟過程中所起的作用不同，可將它分為中樞免疫器官和外周免疫器官，前者是T細(xì)胞和B細(xì)胞發(fā)生、分化、成熟的場所，后者是T細(xì)胞和B細(xì)胞定居、增殖和接受抗原刺激產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答的場...

2016 02-03

幾種常用的親和純化技術(shù)

串聯(lián)親和純化屬于親和純化的一種（比較了幾種常用的親和純化技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)和常見應(yīng)用領(lǐng)域）。zui常用的親和純化技術(shù)是免疫沉淀法，通過抗體-抗原的親和作用，“捕捉”到相互作用的蛋白。但是普通的免疫沉淀法由于...

2016 02-01

宿主感染的細(xì)菌

細(xì)菌侵入宿主機(jī)體生長繁殖并釋放毒性物質(zhì)引起不同程度的病理過程，稱為細(xì)菌的感染（bacterialinfection）或傳染。能使宿主感染的細(xì)菌為致病菌或病原菌（pathogenicbacte-rium...

2016 01-29

造血干細(xì)胞的檢測方法

1.脾克隆形成法該方法是人類認(rèn)識HSCzui早的方法，主要用于評估小鼠的HSC:將小鼠的骨髓或脾細(xì)胞注射到經(jīng)放射線照射過的小鼠體內(nèi)，通過觀察CFU-S的數(shù)量和種類來推知HSC。這種方法不能用于測量人類...

2016 01-27

酵母人工染色體載體

酵母人工染色體載體酵母人工染色體載體（ＹＡＣ）是由ＣＥＮ載體發(fā)展而來的。它的主要組成如下：（１）著絲粒；（２）兩個端粒：存在于染色體的末端，使染色體正確地結(jié)束復(fù)制，防止染色體被外切酶切割；（３）復(fù)制起...

2016 01-25

培養(yǎng)基成分劃分以及物理狀態(tài)劃分

1．根據(jù)培養(yǎng)基成分劃分(1)天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基指利用動、植物或微生物體或其提取物制成的培養(yǎng)基，其成分復(fù)雜且難以確定。常用的天然有機(jī)物有牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、麥芽汁、玉米粉、血清、稻草浸汁、羽毛浸汁...

2016 01-22

多肽鏈的延長

核糖體是多肽鏈合成的主要場所，在大亞基和小亞基的交界面形成了3個tRNA結(jié)合位點(diǎn)，分別為A、P和E位點(diǎn)。A位點(diǎn)是氨基酰tRNA的結(jié)合位點(diǎn)，P位點(diǎn)是肽基酰tRNA的結(jié)合位點(diǎn)，E位點(diǎn)是脫氨基酸后的空載tR...

2016 01-20

烈性噬菌體與噬菌體的分離及效價測定

噬菌體是一種專門寄生在微生物體內(nèi)的病毒，它的頭、尾外部都有由蛋白質(zhì)組成的外殼(頭膜和尾鞘)，頭的內(nèi)部含有DNA。噬菌體的生活過程可分為對宿主的吸附、侵入、增殖、成熟和裂解五個階段。噬菌體分為烈性噬菌體...

2016 01-18

骨髓細(xì)胞分離培養(yǎng)

骨髓作為主要的造血場所，可進(jìn)行體外培養(yǎng)。在無菌條件下，把骨髓細(xì)胞分離出來，置于培養(yǎng)系統(tǒng)中，在合適的環(huán)境中，提供營養(yǎng)物質(zhì)，使其繼續(xù)生存或生長。通過培養(yǎng)骨髓，可見到造血干細(xì)胞不同分化階段時各種血細(xì)胞的前驅(qū)...

2016 01-15

本底及假陽性產(chǎn)生的原因分析

本底及假陽性產(chǎn)生的原因分析1.基因工程抗原與合成肽抗原的區(qū)別1.1基因工程抗原是抗原基因在質(zhì)粒載體中原核或真核表達(dá)的蛋白質(zhì)抗原，多以大腸桿菌或酵母菌為表達(dá)系統(tǒng)。該類抗原與合成肽相比具有以下特點(diǎn)：a.分...

2016 01-13

吸附柱層析法

層析法是一種物理分離方法。柱層析法是層析方法中的一個類型，分為吸附柱層析法和分配柱層析法。ELISA試劑盒吸附柱層析法是分離、純化和鑒定有機(jī)物的重要方法。它是根據(jù)混合物中各組分的分子結(jié)構(gòu)和性質(zhì)（極性）...

2016 01-11

以釀酒酵母為宿主的常見載體

在一些情況下，例如需要對真核微生物的代謝途徑進(jìn)行修飾，或者需要表達(dá)的真核生物蛋白需要合適的翻譯后修飾才具有生物活性時，就需要采用真核微生物表達(dá)載體。真核細(xì)胞基因表達(dá)調(diào)控要比原核細(xì)胞基因復(fù)雜得多，用于真...

2016 01-08

細(xì)胞懸浮培養(yǎng)類型和方法

細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是將細(xì)胞懸浮在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行的無菌培養(yǎng)。培養(yǎng)類型和方法(一)成批培養(yǎng)將細(xì)胞培養(yǎng)在一定容積的密閉容器中進(jìn)行培養(yǎng)。它是進(jìn)行細(xì)胞生長和細(xì)胞分裂的生理生化研究常用的培養(yǎng)方法。1．成批培養(yǎng)的特點(diǎn)培...

2016 01-06

熒光標(biāo)記原位雜交法

熒光標(biāo)記原位雜交法(fluorescenceinsituhykbridizatlon，F(xiàn)ISH)是近年發(fā)展起來的非放射性標(biāo)記新技術(shù)。FISH可檢測單拷貝基因、表達(dá)mRJA等；其有無毒性、快速、分辨率高...

2016 01-04

同位素法

一、同位素法51Cr釋放法(以CTL為例)51Cr釋放法是用鉻酸鈉(Na51CrO4)標(biāo)記的靶細(xì)胞與致敏淋巴細(xì)胞一起培養(yǎng)，靶細(xì)胞被CTL殺滅后，51Cr即釋放到培養(yǎng)液中，測定釋放到培養(yǎng)液中51Cr的脈...

2015 12-31

胰島素對離體犢牛小腸吸收功能影響的實(shí)驗(yàn)

(一)試驗(yàn)原理新生哺乳動物胃腸道的生長發(fā)育非常迅速，這與初乳的攝入有關(guān)，初乳中含大量多肽類生長因子如胰島素等。本實(shí)驗(yàn)通過體外犢牛小腸上皮細(xì)胞培養(yǎng)法，用細(xì)胞增殖率和葡萄糖吸收率作為細(xì)胞生長發(fā)育及功能成熟...

2015 12-28

染色體畸變的試驗(yàn)方法

染色體畸變是基因突變的一種形式，通常后果比較嚴(yán)重。可用外周血淋巴細(xì)胞，或人和哺乳動物體細(xì)胞系作為材料進(jìn)行檢測，常用的體細(xì)胞系有中國地鼠卵巢細(xì)胞(CHO)，中國地鼠肺成纖維細(xì)胞(V79和CHL)，人胚肺...