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上海一研生物科技有限公司

細胞懸浮培養(yǎng)類型和方法

時間:2016-1-8閱讀:535
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    細胞懸浮培養(yǎng)是將細胞懸浮在液體培養(yǎng)基中進行的無菌培養(yǎng)。

培養(yǎng)類型和方法

(一)成批培養(yǎng)

    將細胞培養(yǎng)在一定容積的密閉容器中進行培養(yǎng)。它是進行細胞生長和細胞分裂的生理生化研究常用的培養(yǎng)方法。

1.成批培養(yǎng)的特點培養(yǎng)基體積固定;必須適當攪拌;培養(yǎng)過程中,細胞生長,其數(shù)目不斷發(fā)生變化,呈s增長;但要進行下一批培養(yǎng),則生長一定時問后,需要繼代轉(zhuǎn)移。

2.成批培養(yǎng)的方法

(1)旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)。

(2)往返震蕩培養(yǎng)。

(3)旋轉(zhuǎn)震蕩培養(yǎng)。

(4)攪動培養(yǎng)。

(二)連續(xù)培養(yǎng)

    在培養(yǎng)過程中,以不斷抽取懸浮培養(yǎng)物并注入等量新鮮培養(yǎng)基,使培養(yǎng)物不斷得到養(yǎng)分補充,保持其恒定體積的培養(yǎng)。

1.連續(xù)培養(yǎng)的特點

(1)新鮮培養(yǎng)基的不斷加人,保證了養(yǎng)分的充分供應。

(2)可使細胞保持在增殖旺盛的對數(shù)生長期中。

(3)適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。

2.連續(xù)培養(yǎng)的種類

(1)半連續(xù)培養(yǎng):每隔一定時間倒出一定量的懸浮液,同時補充加入等量的新鮮培養(yǎng)液。

(2)連續(xù)培養(yǎng):封閉式和開放式。

3.連續(xù)培養(yǎng)的方法

(1)濁度恒定法:這是根據(jù)懸浮液混濁度的提高來注入新鮮培養(yǎng)液的開放式連續(xù)培養(yǎng)。可以人為地選定一種細胞密度,用混濁度法控制細胞密度,此法敏感度提高。

(2)化學恒定法:這是按照某一固定速度,隨培養(yǎng)液一起加入對細胞生長起限制作用的某種營養(yǎng)物質(zhì),使細胞增長速率和細胞密度保持恒定的一種開放式連續(xù)培養(yǎng)法。

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