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初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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細(xì)胞凍存實(shí)驗(yàn)操作流程2025/2/20
實(shí)驗(yàn)原理：隨著溫度降低，細(xì)胞內(nèi)的酶活性會(huì)逐漸降低，到-70℃左右，酶活性幾乎為0，代謝活動(dòng)停止，可以實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期保存。然而，隨著溫度降低，細(xì)胞內(nèi)外的水分也會(huì)“結(jié)冰"并形成冰晶，冰晶能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷...
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)技術(shù)詳細(xì)介紹2025/2/17
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzymelinkedimmunosorbentassay，簡(jiǎn)寫(xiě)ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法...
抗體的主要功能作用有哪些？2025/2/10
抗體（antibody,Ab）是由效應(yīng)B細(xì)胞（效應(yīng)淋巴B細(xì)胞）分泌，機(jī)體用于抵御外來(lái)物質(zhì)，如病毒，細(xì)菌等抗原，結(jié)構(gòu)呈“Y"字型的球狀蛋白質(zhì)，僅僅存在于脊椎動(dòng)物的血液和B淋巴細(xì)胞膜表面。凡是能夠跟抗體結(jié)...
原代細(xì)胞如何分離和培養(yǎng)？2025/2/5
用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來(lái)的細(xì)胞。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，從機(jī)體分離出來(lái)到傳代之前的細(xì)胞稱(chēng)為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，...
ELISA試驗(yàn)手工洗滌介紹2025/1/20
洗滌在ELISA試驗(yàn)過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELSIA試驗(yàn)就是靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過(guò)洗滌以清除殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反...
ELISA檢測(cè)過(guò)程陰性對(duì)照（品）簡(jiǎn)述2025/1/13
陰性對(duì)照（品）：1、陰性對(duì)照（品）的概念與要求：所謂陰性對(duì)照（品），應(yīng)當(dāng)是本項(xiàng)檢測(cè)試驗(yàn)中采用與待撿物（樣品、人用試劑就是人的血清等）具有同源性和同質(zhì)性，又不含有待檢物質(zhì)，并能客觀比較和鑒別處理因素（血...
聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）引物的作用歸納2025/1/6
PCR(聚合酶鏈反應(yīng))是一種常用的分子生物學(xué)技術(shù)，可用于擴(kuò)增DNA序列。在PCR反應(yīng)中，引物是起關(guān)鍵作用的短鏈DNA分子，它們會(huì)與待擴(kuò)增DNA序列的兩端匹配，指示聚合酶在這些位置開(kāi)始復(fù)制DNA。引物在...
影響ELISA試劑盒質(zhì)量因素小結(jié)2024/12/23
ELISA試劑盒變質(zhì)是ELISA實(shí)驗(yàn)中比較常見(jiàn)的問(wèn)題，下面小結(jié)影響ELISA試劑盒質(zhì)量事項(xiàng)。1、試劑因素不同批次的ELISA試劑在制作過(guò)程中很難保證質(zhì)量全一致，即使是通過(guò)批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)結(jié)果也存在差...
ELISA雙抗夾心法具體操作步驟2024/12/17
ELISA雙抗夾心法首先也是用特異性抗體包被于固相載體，經(jīng)洗滌后加入含有抗原之待測(cè)樣品，如待檢樣品中有相應(yīng)抗原存在，即可與包被于固相載體上的特異性抗體結(jié)合，經(jīng)保溫孵育洗滌后，即可加入酶標(biāo)記特異性抗體，...
細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)菌操作關(guān)鍵點(diǎn)2024/12/9
細(xì)胞培養(yǎng)最看重的就是無(wú)菌操作，無(wú)菌操作是細(xì)胞培養(yǎng)是否成功的關(guān)鍵點(diǎn)。1、使用前用75%的乙醇擦拭細(xì)胞間的桌面、超凈臺(tái)、孵箱和離心機(jī)等；紫外照射細(xì)胞間和超凈臺(tái)30分鐘以上才可以進(jìn)入使用。2、進(jìn)入細(xì)胞間必須...
PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)設(shè)計(jì)引物詳解2024/12/2
PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素：參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任...
靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)操作步驟2024/11/25
原代細(xì)胞培養(yǎng)是將機(jī)體內(nèi)的某組織取出，分散成單細(xì)胞，在人工條件下培養(yǎng)使其生存并不斷生長(zhǎng)、繁殖的方法。借助這種方法可以觀察細(xì)胞的分裂繁殖、細(xì)胞的接觸抑制、以及細(xì)胞的衰老，死亡等生命現(xiàn)象。靜置貼壁細(xì)胞(包括...
ELISA檢測(cè)類(lèi)型的共同階段2024/11/18
ELISA檢測(cè)是一種免疫檢測(cè)方法，通常用于測(cè)量生物樣品中的抗體或抗原，包括蛋白質(zhì)或糖蛋白。像其他免疫檢測(cè)法一樣，它們依靠抗體與目標(biāo)的結(jié)合來(lái)促進(jìn)檢測(cè)。通常情況下，ELISA檢測(cè)是在96孔板中進(jìn)行的，這種...
細(xì)胞培養(yǎng)中污染源有哪些？2024/11/4
細(xì)胞培養(yǎng)是指將細(xì)胞從動(dòng)物或植物體內(nèi)取出，然后在適宜的人工環(huán)境中生長(zhǎng)的過(guò)程。細(xì)胞可以在培養(yǎng)前直接從組織中取出并通過(guò)酶或機(jī)械方法進(jìn)行解離，也可以來(lái)源于已建立的細(xì)胞系或細(xì)胞株。細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)是在細(xì)胞房中進(jìn)行，...
無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)缺點(diǎn)2024/10/28
無(wú)血清培養(yǎng)基是不添加動(dòng)物來(lái)源血清或其他生物提取液，但仍可以維持細(xì)胞在體外較長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)、繁殖的培養(yǎng)基。無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)：1.可避免血清批次間的質(zhì)量變動(dòng)，提高細(xì)胞培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。2.避免血清對(duì)細(xì)...
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