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PCR試劑盒試驗(yàn)反應(yīng)引物設(shè)計(jì)要點(diǎn)2023/12/25
引物設(shè)計(jì)有3條基本原則：首先引物與模板的序列要緊密互補(bǔ)，其次引物與引物之間避免形成穩(wěn)定的二聚體或發(fā)夾結(jié)構(gòu)，再次引物不能在模板的非目的位點(diǎn)引發(fā)DNA聚合反應(yīng)(即錯(cuò)配)。引物設(shè)計(jì)應(yīng)注意如下要點(diǎn)：1、引物的...
河弧菌(VF)檢測試劑盒(熒光-PCR法)使用方法2023/12/18
河弧菌(VF)檢測試劑盒(熒光-PCR法)使用方法:一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能...
各種抗體的保存方法匯集2023/12/11
1、抗體濃度抗體濃度過低（2、多克隆抗體多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大。然而，一旦抗體被純化后，儲存在50%的甘油中于-20℃保存，即使沒有凍融，其活性的損失也可以觀察到，盡管其進(jìn)...
小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A7ELISA試劑盒常用標(biāo)本收集2023/12/4
ELISA是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。常規(guī)用于ELISA實(shí)驗(yàn)的樣本包含血清、血漿、組織勻漿等。不同樣本類型的預(yù)處理方法存在差異，合適的樣本預(yù)處理是確保ELISA實(shí)...
抗體檢測方法陳述2023/11/28
抗體,也叫免疫球蛋白(Ig),是一種能特異性結(jié)合抗原的糖蛋白,而抗原是在易感染動(dòng)物體內(nèi)引發(fā)抗體產(chǎn)生的物質(zhì)?？贵w檢測的三種方法：1、直接免疫熒光法(IIF)這種的實(shí)驗(yàn)辦法可以對人體內(nèi)含有的抗體和試劑里面...
?PCR反應(yīng)循環(huán)參數(shù)分析2023/11/20
循環(huán)參數(shù):1.預(yù)變性模板DNA全變性與PCR酶的全激活對PCR能否成功至關(guān)重要，建議加熱時(shí)間參考試劑說明書，一般未修飾的Taq酶激活時(shí)間為兩分鐘。2.變性步驟循環(huán)中一般95℃，30秒足以使各種靶DNA...
移液和洗滌技術(shù)對CV值高的影響2023/11/13
免疫檢測法的精確性表現(xiàn)為單次實(shí)驗(yàn)孔間（批內(nèi)）的重復(fù)性和多次實(shí)驗(yàn)之間（批間）的重復(fù)性。CV值高則表明精確度低，通常由以下兩個(gè)原因造成：移液技術(shù)和洗滌技術(shù)。一、移液技術(shù)1.移液時(shí)，槍頭應(yīng)對準(zhǔn)孔，避免接觸孔...
檢測抗體三種方法介紹2023/11/6
抗體是哺乳動(dòng)物適應(yīng)性免疫系統(tǒng)對抗病原體的核心，它是在病原體刺激下由漿細(xì)胞（效應(yīng)B細(xì)胞）所分泌的一種免疫球蛋白，能夠識別并結(jié)合特異的病原體抗原，隨后通過介導(dǎo)中和作用、調(diào)理作用、效應(yīng)T細(xì)胞殺傷等來清除病原...
原代細(xì)胞的兩種傳代培養(yǎng)方法2023/10/30
原代細(xì)胞是指從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞，稱為原代細(xì)胞。一股認(rèn)為，培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)...
PCR反應(yīng)假陰性及假陽性問題可能原因及解決方法2023/10/23
一、假陰性（無擴(kuò)增產(chǎn)物）現(xiàn)象：正對照有條帶，樣品無條帶可能原因：·模板：含有Taq酶抑制劑、雜蛋白，模板上樣量低或模板降解·引物：引物降解，引物設(shè)計(jì)不合理·試劑：酶失活，buffer不合適·反應(yīng)條件：...
糖原合成酶（GCS）試劑盒微量法測定步驟2023/10/17
糖原合成酶（Glycogensynthase，GCS）試劑盒測定原理：GCS催化UDPG和葡萄糖殘基生成糖原和UDP，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下測定N...
培養(yǎng)基的滅菌方法2023/10/8
所謂滅菌就是殺死一切微生物，包括微生物的營養(yǎng)體和芽孢，這一概念不同于消毒。滅菌的方法很多，在實(shí)驗(yàn)室可以使用干熱滅菌、對于環(huán)境可以使用化學(xué)試劑滅菌，但化學(xué)試劑的滅菌方法有很大的限制。在工業(yè)生產(chǎn)中，對于培...
小鼠elisa檢測試劑盒標(biāo)本收集處理2023/10/3
elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。elisa檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血...
ELISA試驗(yàn)常見問題與解決方法歸總2023/9/25
ELISA即酶聯(lián)免疫吸附測定，是一類常用的免疫酶技術(shù)。主要方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，然后利用酶標(biāo)記（偶聯(lián)）的抗體或抗原與之孵育，加入顯色劑顯色，通過酶標(biāo)儀測定待測物顏色與標(biāo)準(zhǔn)物顏色的...
PCR的血液標(biāo)本保存之單個(gè)核細(xì)胞分離出來方法2023/9/18
PCR的血液標(biāo)本保存最好是用淋巴細(xì)胞分離液把單個(gè)核細(xì)胞分離出來，然后-80℃保存。外周血單個(gè)核細(xì)胞（Peripheralbloodmononuclearcell,PBMC）的分離是免疫學(xué)研究中的一項(xiàng)基...
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