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ELISA實驗包被的方式解讀2025/4/7
將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。蛋白質(zhì)與(C8H8)n固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面...
PCR反應(yīng)實驗問題解讀2025/3/31
聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。PCR實驗過程中問題詳解：一、沒有ct值檢測...
影響蛋白質(zhì)鹽析的因素歸納2025/3/24
蛋白質(zhì)通過鹽析的辦法沉淀的原理是降低蛋白質(zhì)的溶解度，使蛋白質(zhì)凝聚而從溶液中析出。影響鹽析的有以下因素：1．蛋白質(zhì)濃度高濃度蛋白溶液可以節(jié)約鹽的用量，但許多蛋白質(zhì)的b和Ks常數(shù)十分接近，若蛋白濃度過高，...
蛋白質(zhì)定量分析實驗說明2025/3/17
蛋白質(zhì)的定量分析主要依靠蛋白質(zhì)本身的發(fā)色基團，或與其它顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生的紫外吸收來進行的。目前常用的蛋白質(zhì)的定量主要有紫外線吸收法、Bradford法及BCA法等。實驗原理：BCA(bicinchoni...
制作細胞劃痕實驗需要注意事項2025/3/11
傷口愈合試驗，也通常稱為“劃痕試驗”，是一種廣泛建立的研究體外集體細胞遷移的技術(shù)。細胞劃痕（WoundHealing)是一種操作簡單，經(jīng)濟實惠的研究細胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。其實驗原理是，當(dāng)細...
細胞傳代技術(shù)操作步驟2025/3/3
細胞傳代技術(shù)操作步驟：1、紫外照射滅菌后，我們應(yīng)該穿好滅菌服，戴好滅菌手套和口罩。2、從培養(yǎng)箱取出細胞培養(yǎng)瓶（一般選擇處于對數(shù)期的細胞），用酒精噴壺在培養(yǎng)瓶表面噴灑75%酒精消毒，轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶到超凈臺。...
ELISA檢測方法優(yōu)缺點分述2025/2/26
ELISA檢測主要方法有直接法、間接法、雙抗體夾心法和競爭法。1、直接法（directELISA）將抗原直接固定在固相載體上，參加酶符號的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。優(yōu)勢：...
類器官蛋白提取方法2025/2/24
類器官蛋白提取方法：一、試劑準備（細胞漿、細胞核及細胞膜蛋白抽提試劑盒）1、準備溶液1）室溫融解試劑盒中的各種溶液，溶解后除結(jié)構(gòu)蛋白提取液外，其他試劑立即置于冰上；2）結(jié)構(gòu)蛋白提取液溶解后，可放置于3...
細胞凍存實驗操作流程2025/2/20
實驗原理：隨著溫度降低，細胞內(nèi)的酶活性會逐漸降低，到-70℃左右，酶活性幾乎為0，代謝活動停止，可以實現(xiàn)長期保存。然而，隨著溫度降低，細胞內(nèi)外的水分也會“結(jié)冰"并形成冰晶，冰晶能導(dǎo)致細胞內(nèi)發(fā)生機械損傷...
酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)技術(shù)詳細介紹2025/2/17
酶聯(lián)免疫吸附測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，簡寫ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法...
抗體的主要功能作用有哪些？2025/2/10
抗體（antibody,Ab）是由效應(yīng)B細胞（效應(yīng)淋巴B細胞）分泌，機體用于抵御外來物質(zhì)，如病毒，細菌等抗原，結(jié)構(gòu)呈“Y"字型的球狀蛋白質(zhì)，僅僅存在于脊椎動物的血液和B淋巴細胞膜表面。凡是能夠跟抗體結(jié)...
原代細胞如何分離和培養(yǎng)？2025/2/5
用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，...
ELISA試驗手工洗滌介紹2025/1/20
洗滌在ELISA試驗過程中雖不是一個反應(yīng)步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA試驗就是靠洗滌來達到分離游離的和結(jié)合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反...
ELISA檢測過程陰性對照（品）簡述2025/1/13
陰性對照（品）：1、陰性對照（品）的概念與要求：所謂陰性對照（品），應(yīng)當(dāng)是本項檢測試驗中采用與待撿物（樣品、人用試劑就是人的血清等）具有同源性和同質(zhì)性，又不含有待檢物質(zhì)，并能客觀比較和鑒別處理因素（血...
聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）引物的作用歸納2025/1/6
PCR(聚合酶鏈反應(yīng))是一種常用的分子生物學(xué)技術(shù)，可用于擴增DNA序列。在PCR反應(yīng)中，引物是起關(guān)鍵作用的短鏈DNA分子，它們會與待擴增DNA序列的兩端匹配，指示聚合酶在這些位置開始復(fù)制DNA。引物在...
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