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聚合酶鏈PCR反應特點合集2025/4/27
PCR原理是生物學的聚合酶鏈反應。PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經(jīng)常是60...
支原體污染細胞常用清除方法2025/4/21
細胞是構(gòu)成生命的基本單位,包括所有生物體(動物、植物、細菌和真菌),但不包括病毒。細胞由細胞膜、細胞核(在真核細胞中)和其他細胞器組成,具有特定的結(jié)構(gòu)和功能。支原體污染細胞常用清除方法:支原體污染細胞...
ELISA技術(shù)應用范圍和特點2025/4/15
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認為ELISA法...
ELISA實驗包被的方式解讀2025/4/7
將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。蛋白質(zhì)與(C8H8)n固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面...
PCR反應實驗問題解讀2025/3/31
聚合酶鏈式反應(PCR)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA復制,PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。PCR實驗過程中問題詳解:一、沒有ct值檢測...
影響蛋白質(zhì)鹽析的因素歸納2025/3/24
蛋白質(zhì)通過鹽析的辦法沉淀的原理是降低蛋白質(zhì)的溶解度,使蛋白質(zhì)凝聚而從溶液中析出。影響鹽析的有以下因素:1.蛋白質(zhì)濃度高濃度蛋白溶液可以節(jié)約鹽的用量,但許多蛋白質(zhì)的b和Ks常數(shù)十分接近,若蛋白濃度過高,...
蛋白質(zhì)定量分析實驗說明2025/3/17
蛋白質(zhì)的定量分析主要依靠蛋白質(zhì)本身的發(fā)色基團,或與其它顯色劑反應產(chǎn)生的紫外吸收來進行的。目前常用的蛋白質(zhì)的定量主要有紫外線吸收法、Bradford法及BCA法等。實驗原理:BCA(bicinchoni...
制作細胞劃痕實驗需要注意事項2025/3/11
傷口愈合試驗,也通常稱為“劃痕試驗”,是一種廣泛建立的研究體外集體細胞遷移的技術(shù)。細胞劃痕(WoundHealing)是一種操作簡單,經(jīng)濟實惠的研究細胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。其實驗原理是,當細...
細胞傳代技術(shù)操作步驟2025/3/3
細胞傳代技術(shù)操作步驟:1、紫外照射滅菌后,我們應該穿好滅菌服,戴好滅菌手套和口罩。2、從培養(yǎng)箱取出細胞培養(yǎng)瓶(一般選擇處于對數(shù)期的細胞),用酒精噴壺在培養(yǎng)瓶表面噴灑75%酒精消毒,轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶到超凈臺。...
ELISA檢測方法優(yōu)缺點分述2025/2/26
ELISA檢測主要方法有直接法、間接法、雙抗體夾心法和競爭法。1、直接法(directELISA)將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。優(yōu)勢:...
類器官蛋白提取方法2025/2/24
類器官蛋白提取方法:一、試劑準備(細胞漿、細胞核及細胞膜蛋白抽提試劑盒)1、準備溶液1)室溫融解試劑盒中的各種溶液,溶解后除結(jié)構(gòu)蛋白提取液外,其他試劑立即置于冰上;2)結(jié)構(gòu)蛋白提取液溶解后,可放置于3...
細胞凍存實驗操作流程2025/2/20
實驗原理:隨著溫度降低,細胞內(nèi)的酶活性會逐漸降低,到-70℃左右,酶活性幾乎為0,代謝活動停止,可以實現(xiàn)長期保存。然而,隨著溫度降低,細胞內(nèi)外的水分也會“結(jié)冰"并形成冰晶,冰晶能導致細胞內(nèi)發(fā)生機械損傷...
酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)技術(shù)詳細介紹2025/2/17
酶聯(lián)免疫吸附測定(enzymelinkedimmunosorbentassay,簡寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體特異性結(jié)合進行免疫反應的定性和定量檢測方法...
抗體的主要功能作用有哪些?2025/2/10
抗體(antibody,Ab)是由效應B細胞(效應淋巴B細胞)分泌,機體用于抵御外來物質(zhì),如病毒,細菌等抗原,結(jié)構(gòu)呈“Y"字型的球狀蛋白質(zhì),僅僅存在于脊椎動物的血液和B淋巴細胞膜表面。凡是能夠跟抗體結(jié)...
原代細胞如何分離和培養(yǎng)?2025/2/5
用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說,從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞,絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān)),再加上取材,成本等因素,...

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