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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間：2017-06-01 09:15:41瀏覽次數(shù)：679
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形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣貼壁生長(zhǎng)
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 此細(xì)胞株源自CV-1細(xì)胞株，經(jīng)轉(zhuǎn)染起始點(diǎn)缺失的SV40病毒突變體得到；編碼表達(dá)野生型T抗原，所以該細(xì)胞適合作為需要SV40 T抗原表達(dá)的載體的轉(zhuǎn)染宿主。該細(xì)胞表達(dá)T抗原，允許SV40病毒的溶解性生長(zhǎng)，支持40℃時(shí)溫度敏感性A209毒的復(fù)制，支持起始區(qū)域缺陷的SV40突變體的復(fù)制。因含有SV40毒的DNA序列，該細(xì)胞需要在*中操作。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:4~1:8傳代；每周2~3次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR -
同工酶
染色體 83~102
使用權(quán)限 A類
成纖維細(xì)胞樣貼壁生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重，然后按10微克／克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后，將動(dòng)物處死，用剪刀剪開皮膚和肌肉，取出大腿骨和脛骨，剔凈股骨上的肌肉，然后用一小塊紗布來(lái)回搓干凈。剪開兩端股骨，用注射器（內(nèi)裝5ml 1％ 檸檬酸鈉溶液）緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中，經(jīng)平衡后離心8分鐘，速度為1000轉(zhuǎn)／分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液，留沉淀物0.2ml，加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度，用吸管沖勻沉淀物，在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后，以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液，留0.2ml沉淀物，沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1～2次，離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液，留0.2ml沉淀物，加4滴新配的固定液，沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片，每片滴3滴細(xì)胞懸液，立即用嘴向載片上吹氣，使細(xì)胞均勻分散，在酒精燈火焰上來(lái)回烤一下，以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10：1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH＝6.8磷酸緩沖液稀釋)，然后用水沖洗，片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相，轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目，屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
TNFRSF14 cDNA Rat 大鼠 TNFRSF14 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PDCD1 cDNA Rat 大鼠 PDCD1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
BMP8A cDNA Rat 大鼠 BMP8A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CRISP2 cDNA Rat 大鼠 CRISP2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CTSS cDNA Rat 大鼠 CTSS 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SERPINE1 cDNA Rat 大鼠 SERPINE1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
VEGFA cDNA Rat 大鼠 VEGFA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
DMWD cDNA Rat 大鼠 PRKD2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IGF1R cDNA Canine 狗 IGF1R 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ACVR2A cDNA Canine 狗 ACVR2A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
XCL1 cDNA Canine 狗 XCL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TNFRSF9 cDNA Canine 狗 TNFRSF9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TNFRSF19 cDNA Canine 狗 TNFRSF19 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL1R2 cDNA Canine 狗 IL1R2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD27 cDNA Canine 狗 CD27 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL34 cDNA Canine 狗 IL34 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL25 cDNA Canine 狗 IL25 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NGFR cDNA Canine 狗 NGFR / TNFRSF16 基因全長(zhǎng)ORF克隆
BMP2 cDNA Canine 狗 BMP2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TGFB1 cDNA Canine 狗 TGFB1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CSF1R cDNA Canine 狗 CSF1R 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL12RB2 cDNA Canine 狗 IL12RB2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NRG1 cDNA Canine 狗 NRG1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL22RA1 cDNA Canine 狗 IL22RA1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL2RB cDNA Canine 狗 IL2RB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL18R1 cDNA Canine 狗 IL18R1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL20RA cDNA Canine 狗 IL20RA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL13RA2 cDNA Canine 狗 IL13RA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL11RA cDNA Canine 狗 IL11RA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL3RA cDNA Canine 狗 IL3RA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TGFB3 cDNA Canine 狗 TGFB3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
BMP5 cDNA Canine 狗 BMP5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
BMP4 cDNA Canine 狗 BMP4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
EFNB2 cDNA Canine 狗 EFNB2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
EFNA5 cDNA Canine 狗 EFNA5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CX3CL1 cDNA Canine 狗 CX3CL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TNFSF12 cDNA Canine 狗 TNFSF12 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TNFSF10 cDNA Canine 狗 TNFSF10 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD40LG cDNA Canine 狗 CD40LG 基因全長(zhǎng)ORF克隆
LTB cDNA Canine 狗 LTB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
LTA cDNA Canine 狗 LTA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CXCL17 cDNA Canine 狗 CXCL17 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GDF2 cDNA Canine 狗 GDF2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
HGF cDNA Canine 狗 HGF 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GFRA1 cDNA Canine 狗 GFRA1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ACVR1B cDNA Canine 狗 ACVR1B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CXCL16 cDNA Canine 狗 CXCL16 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGF18 cDNA Canine 狗 FGF18 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCL25 cDNA Canine 狗 CCL25 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CXCL13 cDNA Canine 狗 CXCL13 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCL26 cDNA Canine 狗 CCL26 基因全長(zhǎng)ORF克隆
