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公司是*的ATCC細胞供應商，提供SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞；WI38/VA13的報價，咨詢，稱技術服務，咨詢選購。
細胞名稱     SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞；WI38/VA13        
形態(tài)特性      上皮細胞樣        
生長特性     貼壁生長        
特征特性      該細胞1964年建系，源自3個月胎齡的女性胚胎的肺成纖維細胞，經(jīng)SV-40轉(zhuǎn)化。         
培養(yǎng)條件      MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS        
傳代方法      1:2～1:10傳代，每周換液2次        
傳代情況     C2        
凍存條件      基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS        
支原體檢測     培養(yǎng)法（-）        
STR             
同工酶             
染色體      45～89        
使用權限     A類
培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質(zhì)：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

PRMT5     cDNA    Human    人 PRMT5 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
CDK2     cDNA    Human    人 CDK2 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
IL21     cDNA    Human    人 IL21 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
RTN4R     cDNA    Human    人 RTN4R / NOGOR 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
IL15     cDNA    Human    人 IL15 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
CD40LG     cDNA    Human    人 CD40L / TNFSF5 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
CD34     cDNA    Human    人 CD34 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
PTPRC     cDNA    Human    人 CD45 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
SMAD1     cDNA    Mouse    小鼠 Smad1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
TCN2     cDNA    Mouse    小鼠 TCN2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
ACVRL1     cDNA    Mouse    小鼠 ALK-1 / ACVRL1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
IL6     cDNA    Mouse    小鼠 IL6 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
IL6     cDNA    Mouse    小鼠 IL6 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
BMPR1A     cDNA    Mouse    小鼠 ALK-3 / BMPRIA 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
TMPRSS2     cDNA    Human    人 TMPRSS2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
IL12RB1     cDNA    Human    人 IL12RB1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
PRKD2     cDNA    Human    人 PRKD2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
WHSC1     cDNA    Human    人 WHSC1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
APP     cDNA    Human    人 APP / PN2 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CFD     cDNA    Human    人 CFD 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽