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做cellbiology實(shí)驗(yàn),細(xì)胞鋪板大概是很常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)了。但是有很多人不是很得要領(lǐng),鋪得不是均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿頂。在這里分享一些一些技巧:1、一般96孔板每孔是加100微升細(xì)胞懸液,從孔的左邊靠近底部加入,加完半邊板后,將未加的細(xì)胞懸液混一下再,繼續(xù)加剩余的半邊板子,都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(一般輕巧敲三下),太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)(逆時(shí)針效果不好),依次敲擊剩余三個(gè)邊,靜置約5分鐘,放入3
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犬鉤端螺旋體抗體IgG(Lep IgG)elisa試劑盒說明書
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1ng/L-45ng/L使用目的:本試劑盒用于測定犬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中鉤端螺旋體抗體IgG(LepIgG)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中犬鉤端螺旋體抗體IgG(LepIgG)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入鉤端螺旋體抗體IgG(LepIgG),再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃 -
ELISA標(biāo)準(zhǔn)操作及技術(shù)服務(wù)的常見問題分析
一.ELISA標(biāo)準(zhǔn)操作要點(diǎn)優(yōu)質(zhì)的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的本公司要求使用的純化水電導(dǎo)率小于1.5μs/cm。1.標(biāo)本的采取和保存大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP, -
大部分elisa檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按慣例方法收集,應(yīng)留意防止溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為符號(hào)的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)添加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)發(fā)生假陽性反應(yīng)。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃。超越一周測定的需-20℃保存。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,散布不均,應(yīng)充沛混勻并防止發(fā)生氣泡。混濁或有沉積的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,弄清后再檢測。重復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)下跌,所
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本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T10ng/L-260ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中生存素(survivin)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人生存素(survivin)水平。用純化的人生存素(survivin)體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入生存素(survivin),再與HRP標(biāo)記的生存素(survivin)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色
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想要的ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果為什么不一致?
絕大多數(shù)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)人員頭疼的問題,莫過于試驗(yàn)成果不抱負(fù)。其實(shí)做科研試驗(yàn),就是這樣在不斷探究中尋求真理。很難有人可以的試驗(yàn)成功。可是,我在做試驗(yàn)過程中可以盡量防止哪些常犯的過錯(cuò)呢?jin天讓我們一同來看一下,影響ELISA試驗(yàn)成果不抱負(fù)的原因有哪些?操作應(yīng)對(duì)試驗(yàn)的物理參數(shù)有充沛的了解,如環(huán)境溫度(保持在18c~25℃)、反響孵育溫度和孵育時(shí)刻、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。2.正確運(yùn)用加樣器加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本或試劑,ELISA試劑盒防止刮擦包被板底部。加樣過程中防止液 -
如何利用ELISA篩選以及ELISA方法操作的注意事項(xiàng)有哪些呢?相信很多做實(shí)驗(yàn)的小伙伴都有這樣的疑問,今天小編就給大家總結(jié)一下,注意聽講哦!ELISA,全稱酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),主要利用的是抗原抗體特異性結(jié)合的特點(diǎn),可分為直接法、間接法、雙抗體夾心法、競爭法等。下面以間接法為例進(jìn)行介紹:1、方陣ELISA。用途:①融合前后確定鼠血清中抗體效價(jià);②拿到單抗腹水后,需要建立ELISA方法時(shí)首先要確定包被原及抗體的優(yōu)質(zhì)工作濃度。經(jīng)典的方陣ELISA:將抗原和抗體各自稀釋成不同梯度濃度,結(jié)果OD值P/N2的
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人葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD) ELISA試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T10ng/L-360ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)水平。用純化的人葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD),再與HRP標(biāo)記的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過CHE底洗滌后加底物TM