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細胞 凍存 復蘇

時間:2015-10-30閱讀:142
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細胞 凍存 復蘇

細胞凍存和復蘇可以:(1)用于生物學保種;(2)用于醫(yī)學上干細胞研究;(3)用于傳代培養(yǎng)。

實驗方法原理

細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以zui大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結晶對細胞造成損傷。

一、材料準備


1.  儀器:凈化工作臺、 離心機、恒溫水浴箱、冰箱(4℃、-20℃、-70℃)、倒置相差顯微鏡、培養(yǎng)箱、液氮冰箱。


2.  玻璃器皿:吸管(彎頭、直頭)、 培養(yǎng)瓶、玻璃瓶(250ml、100ml)、廢液缸。


3.  塑料器皿: 吸頭、槍頭、膠塞、移液管(10ml)、15ml離心管、凍存管(1~2ml)。


4.  其他物品:微量加樣槍、紅血球計數(shù)板、記號筆、*、移液槍。


5.  試劑:D-Hanks液、小牛血清


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