激情综合啪啪6月丁香,久久久久国产精品91福利,99精品日韩欧美在线观看,91成人午夜福利在线观看国产

源葉標(biāo)準(zhǔn)品網(wǎng)

LGG益生菌的檢測(cè)

時(shí)間:2015-5-8閱讀:870
分享:

1適用范圍:適用于定量分析LGG純菌種及LGG乳制品中的LGG菌數(shù)量。

2定義:LGG是一種鼠李糖乳桿菌菌株(ATCC 53103),革蘭氏陽(yáng)性,過氧化物酶陰性,棒狀,鏈形,不發(fā)酵乳糖,對(duì)*有抗性。

3原理:樣品經(jīng)稀釋劑稀釋后均質(zhì),然后按10倍的稀釋倍數(shù)接種到選擇性瓊脂培養(yǎng)基中,厭氧培養(yǎng),計(jì)數(shù)所有的菌落,結(jié)果以cuf/g計(jì)。

注:培養(yǎng)過程中,所有*抗性的菌株都會(huì)生長(zhǎng)(比如所有的鼠李糖乳桿菌,干酪乳桿菌,胚芽乳桿菌等)。但是,由于LGG不發(fā)酵乳糖,所以可以很容易地區(qū)分開來。進(jìn)一步分析鑒定則可采用基因的方法。

4儀器和玻璃器皿

只要規(guī)格可以滿足要求,采用一次性或可重復(fù)使用的儀器均可。除了微生物實(shí)驗(yàn)室所常用的儀器外,下列儀器是必需的:

烘箱;    高壓殺菌鍋;   培養(yǎng)箱(37℃±1℃);      水?。?4-47℃);

混合器(Peristaltic-type);帶有無(wú)菌塑料袋;        天平。

5培養(yǎng)基和試劑

5.1 稀釋液準(zhǔn)備

蛋白棟1.0g;        氯化鈉8.5g;      去離子水1000mL。

若需要,可緩慢加熱至*溶解。將溶液分至一些瓶子中,然后在高壓殺菌鍋中進(jìn)行殺菌(121℃±1℃,15分鐘)。殺菌后,溶液pH7.0±0.2。

每個(gè)瓶子均可在常溫下貯存半年。

5.培養(yǎng)基

5.2.1 MRS瓊脂培養(yǎng)基:適用于純LGG菌種檢測(cè)。高壓殺菌后pH6.4±0.2,4-6℃條件下可貯存6個(gè)月。

5.2.2 MRS-*瓊脂培養(yǎng)基(MRS-V):適用于LGG菌種與普通酸奶菌種混合后的檢測(cè)。*50mg/L可以在高壓殺菌前加入,也可以作為無(wú)菌濾液加入瓊脂中。

5.2.3 MRSL肉湯培養(yǎng)基(檢測(cè)乳糖發(fā)酵特性)


分別溶解于5-10mL乙醇中,然后加入肉湯中。取5mL試樣,高壓殺菌(121℃±1℃,15分鐘)后作測(cè)試用。殺菌后,溶液pH7.0.2。

6步驟

6.1 樣品制備

樣品制備前,先放置于室溫下1-2小時(shí),以使其溫度與室溫相同。稱取10g樣品于無(wú)菌塑料袋中,加入90ml無(wú)菌蛋白胨-氯化鈉水溶液。將塑料袋放入混合器中混合60秒,以確保懸浮液均勻一致。這是*個(gè)稀釋10倍的樣液,該溶液必須繼續(xù)按10倍的倍數(shù)進(jìn)行稀釋,且必須在15分鐘內(nèi)將各樣液接種到培養(yǎng)皿中。

6.2 在選擇性瓊脂培養(yǎng)基中接種

選擇合適的瓊脂培養(yǎng)基:純菌種用MRS瓊脂培養(yǎng)基,混合菌種用MRS-*瓊脂培養(yǎng)基。取1mL(傾倒法,即Pour-plate method)或0.1mL(涂抹法,即spread-plate method)每一稀釋度的樣液分別接種到兩個(gè)培養(yǎng)皿中,瓊脂的溫度應(yīng)為44-47℃,然后于厭氧條件下進(jìn)行培養(yǎng)(37±1℃,72±6小時(shí))。

6.3 菌落計(jì)數(shù)

計(jì)數(shù)那些LGG菌落在10-300之間的培養(yǎng)皿。LGG菌落特征:光滑、大、白色、圓形或橢圓形、邊緣清晰。

6.4 確認(rèn)實(shí)驗(yàn)

為了進(jìn)一步確認(rèn)菌落是否為L(zhǎng)GG,可從菌落中挑取一些純菌種,進(jìn)行顯微鏡觀察和乳糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)(MRSL肉湯)。做乳糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)時(shí),將挑取的純菌種接種到肉湯培養(yǎng)基后,有氧培養(yǎng)(37±1℃,1-2天)。由于LGG不發(fā)酵乳糖,故肉湯應(yīng)是紫色的(未變色)。而若是能夠利用乳糖的微生物,則肉湯變?yōu)辄S色。實(shí)驗(yàn)時(shí),利用純LGG菌種和任一能夠利用乳糖的其它菌種進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)。

7結(jié)果          以每克樣品中LGG的菌落數(shù)表示,即cfu/g。

8注意事項(xiàng):

1)、制備培養(yǎng)基,滅菌前可將*加到MRS-A培養(yǎng)基中混均,按照培養(yǎng)基標(biāo)簽上使用說明進(jìn)行滅菌;

2)、檢樣前需將樣品在室溫下放置1-2小時(shí),使其溫度與室溫相同,稱取樣品時(shí)應(yīng)將包含LGG益生菌的部分接入稀釋液中,混勻進(jìn)行接種;

3)、根據(jù)樣品特性,接種稀釋倍數(shù)可選擇10-4和10-5,每個(gè)稀釋度分別接種兩個(gè)平皿;

4)、樣品制備完畢,將各樣液接種到培養(yǎng)皿,傾倒溫度為44-47℃培養(yǎng)基,整個(gè)操作過程必須在15分鐘內(nèi)完成,同時(shí)做瓊脂空白試驗(yàn);

5)、待瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平皿放入?yún)捬豕?,再放入?yún)捬鯗y(cè)試條,然后放入產(chǎn)氣袋,產(chǎn)氣袋放入后應(yīng)立即將蓋蓋嚴(yán),避免產(chǎn)氣袋在空氣中暴露時(shí)間過長(zhǎng);

6)、檢樣放入?yún)捬豕藓笤谝?guī)定的培養(yǎng)條件下進(jìn)行培養(yǎng),并隨時(shí)觀察厭氧測(cè)試條顏色變化情況(無(wú)氧為白色,有氧時(shí)為粉色),保證培養(yǎng)條件*達(dá)到無(wú)氧狀態(tài);放入測(cè)試條時(shí)注意不要靠壁,使其處于自然狀態(tài)。(一般在放入培養(yǎng)箱后3-5小時(shí)后觀察,如測(cè)試條顏色發(fā)生變化,應(yīng)再放入產(chǎn)氣袋重新進(jìn)行測(cè)試)。


會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),環(huán)保在線對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。

溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

在線留言