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瓊脂培養(yǎng)基的融化
將培養(yǎng)基放到沸水浴中或采用有相同效果的方法(如高壓鍋中的層流蒸汽)使之融化。經(jīng)過高壓的培養(yǎng)基應(yīng)盡量減少重新加熱時(shí)間,融化后避免過度加熱。
融化后應(yīng)短暫置于室溫中(如2 min)以避免玻璃瓶破碎。 融化后的培養(yǎng)基放入47℃~50℃的恒溫水浴鍋中冷卻保溫(可根據(jù)實(shí)際培養(yǎng)基凝固溫度適當(dāng)提高水浴鍋溫度),直至使用。融化后的培養(yǎng)基應(yīng)盡快使用,放置時(shí)間一般不應(yīng)超過4 h。
未用完的培養(yǎng)基不能重新凝固留待下次使用。敏感的培養(yǎng)基尤應(yīng)注意,融化后保溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,如有特定要求可參考的標(biāo)準(zhǔn)。傾注到樣品中的培養(yǎng)基溫度應(yīng)控制在約45℃左右。
培養(yǎng)基的脫氧
必要時(shí),將培養(yǎng)基在使用前放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15 min;加熱時(shí)松開容器的蓋子;加熱后蓋緊,并迅速冷卻至使用溫度(如FT 培養(yǎng)基)。
添加成分的加入
對(duì)熱不穩(wěn)定的添加成分應(yīng)在培養(yǎng)基冷卻至47℃~50℃時(shí)再加入。無菌的添加成分在加入前應(yīng)先放置到室溫,避免冷的液體造成瓊脂凝結(jié)或形成片狀物。將加入添加成分的培養(yǎng)基緩慢充分混勻,盡快分裝到待用的容器中。
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