（一）原理

酮體包括乙酰乙酸、b —羥丁酸和丙酮三種物質(zhì)。在肝臟中，脂肪酸經(jīng)b —氧化作用生成乙酰CoA。生成的乙酰CoA可經(jīng)代謝縮合成乙酰乙酸，而乙酰乙酸既可脫羧生成丙酮，又可經(jīng)b —羥丁酸脫氫酶 作用被還原生成b —羥丁酸，三種物質(zhì)統(tǒng)稱酮體。酮體為機體代謝的正常中間產(chǎn)物，在肝臟中生成后須被運往肝外組織才能被機體所利用。在正常情況下，動物體內(nèi)含量甚微；患糖尿或食用高脂肪膳食時，血中酮體含量增高，尿中也能出現(xiàn)酮體。

本實驗用丁酸做底物，將之與新鮮的肝勻漿一起保溫后，再測定其中酮體的生成量。

因為在堿性溶液中碘可以將丙酮氧化為碘仿（CHI3 ），所以通過用*（Na2 S2 O3 ）滴定反應(yīng)中剩余的碘就可以計算出所消耗的碘量，進(jìn)而可以求出以丙酮為代表的酮體含量。有關(guān)的反應(yīng)式如下：

根據(jù)滴定樣品與滴定對照所消耗的硫酸鈉溶液體積之差，可以計算由丁酸氧化生成丙酮的量。

（二）試劑及器材

（1）10%（w/v）氫氧化鈉溶液：稱取10g氫氧化鈉，在燒杯 中用少量蒸餾 水將之溶解后，定容至100ml。

（2）0.1mol/L正丁酸溶液：稱取13g碘和約40g*，放置于研缽 中。加入少量蒸餾 水后，將之研磨至溶解。用蒸餾水定容到1000ml，在棕色瓶中保存。此時可用標(biāo)準(zhǔn)*溶液標(biāo)定其濃度。

（3）0.5mol/L正丁酸：取0.05ml正丁酸，用0.5mol/L氫氧化鈉溶液100ml溶解即成。

（4）0.1mol/L*（KIO3 ）溶液：稱取0.8918g干燥的*，用少量蒸餾水將之溶解，zui后定容至250ml

（5）0.1mol/L*（Na2 S2 O3 ）溶液：稱取25g*，將它溶解于適量煮沸的蒸餾水中，并繼續(xù)煮沸5min。冷卻后，用冷卻的已煮沸過的蒸餾水定容到1000ml。此時即可用0.1mol/L*溶液標(biāo)定其濃度。

（6）*溶液的標(biāo)定：將蒸餾水25ml、*2g、*0.5g、10%鹽酸溶液20ml加入一支錐形瓶內(nèi)。另取0.1mol/L*溶液25ml加入其中，然后用*溶液將之滴定至淺黃色。再加入0.1%淀粉溶液2ml，然后繼續(xù)用*溶液將之滴定至藍(lán)色消褪為止。

另設(shè)一空白，其中僅以蒸餾水代替*，其余操作相同。計算*溶液的濃度所依據(jù)的反應(yīng)式如下：

5KI+KIO3 +6HCI=3I2 +6KCI+3H2 O

I2 +2Na2 S2 O3 =Na2 S4 O6 +2NaI

（7）10%（v/v）鹽酸溶液：取10ml鹽酸，用蒸餾水稀釋到100ml。

（8）0.1%（w/v）淀粉溶液：稱取0.1g可溶性淀粉，置于研缽 中。加入少量預(yù)冷的蒸餾水，將淀粉調(diào)成糊狀。再慢慢倒入煮沸的蒸餾水90ml，攪勻后，再用蒸餾水定容至100ml。

（9）0.9%（w/v）CaCl。

（10）1/15mol/L、PH7.7磷酸緩沖液

（A液）1/15mol/L Na2 HPO4 溶液：稱取Na2 HPO4 ·2H2 O1.187g，將之溶解于100ml蒸餾水中即成。

（B液）1/15mol/L KH2 PO4 溶液：稱取KH2 PO4 0.9078g，將之溶解于100ml蒸餾水將之溶解，zui后定容至100ml。

取A液90 ml、B液10 B液，將兩者混合即可。

（12）勻漿器（或攪拌機）、碘量瓶。