名稱 MDA-MB-435細(xì)胞(人乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)
別稱 MDA-MB435; MDAMB435; MDA.MB.435; MDA-435; MDA 435; MDA435; MD Anderson-Metastatic Breast-435
種屬 人
年齡（性別） 女；48歲
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
背景描述 MDA-MB-435細(xì)胞是于1976年建系，源自一位48歲患有乳腺癌女性的胸腔積液。但近來證明MDA-MB-435細(xì)胞被M14黑色素瘤細(xì)胞污染。
生長培養(yǎng)基 Leibovitz's L-15(PM151010)＋10% FBS(164210-500)＋1% P/S(PB180120)
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~26-38 hours
凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮
MDA-MB-435細(xì)胞(人乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)培養(yǎng)條件 氣相：空氣，100/%溫度：37℃
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-12583

細(xì)胞凍存操作要點(diǎn)：

1、細(xì)胞凍存前12~24h，換新鮮培養(yǎng)基，使細(xì)胞一直處于對(duì)數(shù)生長期。

2、待細(xì)胞長至80%匯合時(shí)*消化，用新鮮培養(yǎng)基吹打后制成細(xì)胞懸液，1000rpm離心10min。懸浮細(xì)胞則直接離心。

3、棄上清，加入凍存液重懸細(xì)胞沉淀，調(diào)整細(xì)胞濃度為3×106~1×107cells/mL。將細(xì)胞懸液分至凍存管內(nèi)，每管1~1.5mL，擰緊蓋子。在管壁上做好標(biāo)記，標(biāo)明細(xì)胞名稱、凍存日期等。

4、按下列順序依次降溫：室溫→4℃ 20min→-20℃ 30min→-80℃過夜→液氮保存。也可使用程序降溫盒更為方便，細(xì)胞凍存管放入程序降溫盒內(nèi)可直接放入-80℃過夜，再轉(zhuǎn)至液氮罐內(nèi)。注意程序降溫盒內(nèi)異丙醇的量必須高于zui低刻度線；凍存5次后異丙醇需要跟換一次，以免影響凍存效果。

5、細(xì)胞凍存后應(yīng)取出一管復(fù)蘇，檢測(cè)細(xì)胞的存活率。理論上細(xì)胞可在液氮內(nèi)長期保存，為穩(wěn)妥起見可在細(xì)胞凍存半年后復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察細(xì)胞生長情況，再繼續(xù)凍存。

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