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鏈球菌屬通用PCR檢測試劑盒

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):195次

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使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線

本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1.  即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2.  預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3.  本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

 鏈球菌屬通用PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Streptococcus spp.PCR

貨號

 XG-P2142

 


注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:

編號

成分

十孔盒包裝(去紙托)

試劑一

2×PCR MagicMix

1mL(亮黃蓋)

試劑二

源性成分 PCR 引物混合液

100 uL(白蓋)

試劑三

源性成分 PCR 陽性對照

50 uL(黃蓋)

試劑四

超純水

1 mL(本色蓋)

試劑五

DNA   釋放劑試用裝

50 次(成分見下)

試劑六

免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一

50 uL(白蓋)

試劑七

免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二

100uL(綠蓋)

試劑八

免 DNA 提取試劑溶液 B

400 uL(紅蓋)

試劑九

使用手冊

400 uL(紅蓋)

技術(shù)原理:

       DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。

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CL-0250801-D (人巨細胞性肺癌細胞)5×106cells/瓶×2

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豬細胞;ST 單核巨噬細胞白血病,RAW 264.7細胞 L615細胞,615小鼠網(wǎng)織細胞性白血病瘤株

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EF-18瓊脂EF-18Agar250用于濾膜法檢測食品中沙門氏菌(SN/T1059.1)  進口分裝  鹽酸*  Paroxetine HCl  :  110429-35-1  質(zhì)量規(guī)格:  >98%,半水合物

酪蛋白瓊脂CaseinAgar250用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗(GB標準)  進口分裝  (S)-1-基-3-丁基硼酸蒎烷二醇酯三醋酸鹽  (S)-BoroLeu-(-)-Pinanediol-CF3COOH  :  477254-69-6  質(zhì)量規(guī)格:  >97%

SCHAEDLER瓊脂SCHAEDLERAGAR250用于厭氧菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)  進口分裝  *  Bromhexine HCl  :  611-75-6  質(zhì)量規(guī)格:  純度>99%CNDP2 Others Mouse 小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

滑膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

人髓母細胞瘤細胞;Daoy

HMy2.CIR細胞,人B淋巴母細胞 人肝癌細胞,H7402細胞 CL-0200RWPE1(人前列腺上皮細胞)5×106cells/瓶×2

中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1

LDLR Others Mouse 小鼠 LDLR / LDL Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 

產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

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