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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T里氏立克次氏體PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-11-06 14:08:51瀏覽次數(shù):168次
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一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Rickettsia risticiiPCR |
貨號 | XG-P2026 |
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
弗拉特氏菌培養(yǎng)基250g用于弗拉特氏菌平板計數(shù)
R2A瓊脂 低營養(yǎng)培養(yǎng)基,用于水檢測中分離生長緩慢的“貧營養(yǎng)”的細(xì)菌和對營養(yǎng)要求較低的細(xì)菌 500g incubation media R2A瓊脂 低營養(yǎng)培養(yǎng)基,用于水檢測中分離生長緩慢的“貧營養(yǎng)”的細(xì)菌和對營養(yǎng)要求較低的細(xì)菌 500g
短密青霉 產(chǎn)磷酸二脂酶 支/瓶
麥康凱瓊脂平板(9cm)用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)
YGC瓊脂 250g 用于奶和奶制品中霉菌及酵母菌分離培養(yǎng)(ISO方法)LiquidSabourandMedium 進(jìn)口分裝 正己烷(無水級, 95%) n-Hexane : 110-54-3 質(zhì)量規(guī)格: 無水級, 95%
金氏B培養(yǎng)基 進(jìn)口分裝 異丙醇(無水級, 99.5%) Isopropyl Alcohol : 67-63-0 質(zhì)量規(guī)格: 無水級, 99.5%
Brain-HeartBaptistextractionliquidmedium 進(jìn)口分裝 異辛烷(ACS,≥99.0%) Isooctane : 540-84-1 質(zhì)量規(guī)格: ACS,≥99.0%
7.5%SodiumChlorideBroth 進(jìn)口分裝 煤油(試劑級) Kerosene : 8008-20-6 質(zhì)量規(guī)格: 試劑級IFNGR1 Others Rat 大鼠 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CM-R041大鼠肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人脊柱間充質(zhì)干細(xì)胞HVMSC
JEG-3/VP16細(xì)胞,人絨癌細(xì)胞耐藥株 新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞,NBTF細(xì)胞 人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HAMSC
IM-9(人外周血B淋巴細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
95-D(人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H099人皮淋巴上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人胚肺成纖維細(xì)胞;CCC-HPF-1
里氏立克次氏體PCR檢測試劑盒APT肉湯250g用于異質(zhì)發(fā)酵乳酸桿菌和其它需高含量鹽酸胺素菌的培養(yǎng)。
mCPC培養(yǎng)基 mCPC Medium 用于弧菌分離培養(yǎng)(FDA標(biāo)準(zhǔn))
示蛋白胨 Tryptose 250克 BR
TGY瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于芽孢菌的培養(yǎng)incubationmediaTGY瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于芽孢菌的培養(yǎng)
Aliz-gal肉湯(茜素-β-半乳糖苷瓊脂) 100g 用于食品中大腸菌群快速檢測醋酸特立帕肽/重組人甲狀旁腺激素(1-34) 進(jìn)口分裝 人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒
進(jìn)口分裝 人A(CsA)ELISA試劑盒
鹽酸 進(jìn)口分裝 人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)ELISA試劑盒
伏立諾他 進(jìn)口分裝 人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒TNFSF8 Others Rat 大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3
膀胱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
EC-304細(xì)胞,人血管內(nèi)皮細(xì)胞 小鼠腎癌細(xì)胞,Kert-3細(xì)胞 人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞總RNAHCPEpiC NA
QG-56(人肺扁平上皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
EAC(小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0238U-87 MG(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
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