使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

產(chǎn)品名稱：豬薩佩羅病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱：Porcine Sapelovirus（PSV）RTPCR
編號：XG-P1963
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分：

技術(shù)原理：

       DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床

改良纖維二糖(mCPC)瓊脂基礎(chǔ)2550g用于創(chuàng)傷弧菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB/T4789.-2008)。

M9 Broth 培養(yǎng)基 250g incubation media M9 Broth 培養(yǎng)基 250g

洋蔥曲霉 支/瓶

雙料月桂基鹽胰蛋白胨肉湯(LST)250g用于大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))

氣單胞菌鑒別瓊脂 250g 用于分離培養(yǎng)和鑒別氣單胞菌(+/-)-3-HYDROXY-GAMMA-BUTYROLACTONE  (±)-3-羥基-r-丁內(nèi)酯  5469-16-9

Triethylsilane  三乙基硅烷  617-86-7

TRIS(TRIMETHYLSILYL)SILANE  三(*硅基)硅烷  1873-77-4

Trimethylsilyl cyanide  三硅烷  7677-24-9CGREF1 Others Human 人 CGREF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2

心肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105次方(1ml)

MCF7細(xì)胞，人癌細(xì)胞 人導(dǎo)管癌細(xì)胞,HCC38細(xì)胞 髓核細(xì)胞生長添加物NPCGS

水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3

IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
豬薩佩羅病毒PCR檢測試劑盒BloodEnrichmentMedium

蠟狀芽孢桿菌選擇瓊脂 incubation media 蠟狀芽孢桿菌選擇瓊脂

PYG液體培養(yǎng)基 250g 培養(yǎng)雙歧桿菌用于乙酸和乳酸代謝產(chǎn)物測定

臍血間質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基Umbilicalcordbloodmesenchymalstemcells,osteogenicdifferentiationmedium

Half–Fraser培養(yǎng)基 250g 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)干擾素誘導(dǎo)蛋白IP-10  進(jìn)口分裝  甘草次酸  Glycyrrhetinic Acid  471-53-4  C30H46O4  ≥98%

免疫球蛋白IgE  進(jìn)口分裝  蓮心堿  Neferine  2292-16-2  C38H44N2O6  ≥98%

巨噬細(xì)胞趨化蛋白-2  進(jìn)口分裝  芒果苷  Mangiferin  4773-96-0  C19H18O11  ≥98%

基質(zhì)金屬蛋白酶-7  進(jìn)口分裝  野鳶尾苷  Iridin  491-74-7  C24H26O13  ≥98%ENPP7 Others Mouse 小鼠 ENPP7 / NPP-7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0910

MV3 人黑色素瘤細(xì)胞

MG-63人骨肉瘤細(xì)胞 Human osteosarcoma cell line MG-63 MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%優(yōu)質(zhì)熱滅活FBS

DKK1 Protein Rhesus 重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, Fc 標(biāo)簽)

人胚肺成纖維細(xì)胞;HFL1 人淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。