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貨號(hào)	XG-X3280	生長(zhǎng)特性	半貼半懸
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

運(yùn)輸和保存：

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

商品信息：

名稱產(chǎn)品	D283 Med人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞	產(chǎn)品別稱	D283 MED; D283-MED; D-283 Med; D-283MED; D283MED; D283Med; D283-Med; D283; Med 283; H283
種屬	人	生長(zhǎng)特性	半貼半懸
換液頻率	2-3次/周	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
貨號(hào)	XG-X3280	組織來(lái)源	腦組織

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO?，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:2-1:4

背景描述 D283 Med細(xì)胞是由Frien等人于1985年建系，源自一名6歲患有神經(jīng)管細(xì)胞瘤有腹腔轉(zhuǎn)移的白人男性小孩的腹水細(xì)胞。

年齡（性別）男；6歲

組織來(lái)源腦組織

細(xì)胞類型腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型成髓瘤細(xì)胞

生物安全等級(jí) 1

倍增時(shí)間 ~52 hours

致瘤性 Yes, in nude mice(The cells form serially transplantable intercranial and subcutaneous tumors.)Yes, in soft agar

基因表達(dá)情況 The cells produce tumors in nude mice and the resulting tumors are glutamine synthetase positive; neuron specific enolase positive; glial fibrillary acidic proteins negative; S100 (S-100) protein negative; The cells express elevated levels of four biochemical markers of SCLC (neuron specific enolase; the brain isoenzyme of creatine kinase; L-DOPA decarboxylase; bombesin-like immunoreactivity)

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-185IZSLER; BS TCL 203KCB; KCB 2010201YJ

D283 Med人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

D283 Med人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠頜下腺上皮細(xì)胞	人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA檢測(cè)試劑盒
人冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞	雞胰島su樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)試劑盒ELISA
人淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞	大鼠α葡萄糖苷mei(a-Glu)ELISA檢測(cè)試劑盒
人卵巢癌組織源細(xì)胞	甲型流感（）病毒H7N4亞型RT-PCR試劑盒
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人滑膜細(xì)胞	禽腎炎病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒
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人膠質(zhì)瘤組織源細(xì)胞	豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒前病毒PCR試劑盒
人角膜基質(zhì)細(xì)胞	豬瘟病毒(CSFV)核suan檢測(cè)試劑盒科研用
人角膜內(nèi)皮細(xì)胞	巴氏線蟲PCR檢測(cè)試劑盒
人角膜上皮細(xì)胞	巴氏阿米巴原蟲PCR試劑盒
人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞	豬托克特諾病毒PCR試劑盒
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞	D283 Med人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞巴氏阿米巴原蟲PCR檢測(cè)試劑盒
人晶狀體上皮細(xì)胞	增殖誘導(dǎo)配體ELISA試劑盒

細(xì)胞處理：

1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。