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肉色諾卡菌PCR檢測試劑盒

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時間:2020-11-05 12:36:21瀏覽次數(shù):173次

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肉色諾卡菌PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品及特點:
本產(chǎn)品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉(zhuǎn)基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內(nèi)完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關(guān)和企業(yè)進行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉和種子。

本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1.  即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2.  預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3.  本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

 肉色諾卡菌PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Nocardia carneaPCR

貨號

 XG-P1832

 

使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1  確定PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液的體積。將PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液轉(zhuǎn)移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD?;旌暇鶆?。
2  將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3  12,000 rpm離心1min,棄濾液。
   注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
       若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
   注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
       此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質(zhì),以獲得高質(zhì)量DN段。
5  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6  12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
   注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時也利于DN段的充分溶解。
7  將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預(yù)熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
   注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
       對溶液Eluent 60℃預(yù)熱,會提高提取DNA目的段的產(chǎn)量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20  μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復(fù),下表只列出一次。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)

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(-)-Gallocatechin gallate  沒食子兒沒食子酸酯  4233-96-9AK2 Others Human 人 AK2 / Adenylate kinase 2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人牙周膜成纖維細胞RNAHPLR miRNA5 μg

盤羊皮膚細胞;ASHS3

LS 174T細胞,結(jié)腸腺癌細胞 鼠黑色素瘤細胞系,B16-F1細胞 人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞;M619

小鼠黑色素瘤瘤株;B16

ACVRL1 Others Human 人 ALK-1 / ACVRL1 人細胞裂解液 (陽性對照)
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WLNutrientAgarClostridiumPerfringensAssayMedium  進口分裝  間硝基(Standard for GC)  m-Nitro  :  36373  質(zhì)量規(guī)格:  Standard for GC

改良克氏雙糖鐵培養(yǎng)基  進口分裝  五(標(biāo)準(zhǔn)品)  Pentachloro  :  133-49-3  質(zhì)量規(guī)格:  分析標(biāo)準(zhǔn)品

三聚胺標(biāo)準(zhǔn)品100mg用于檢測嬰兒奶粉中三聚胺的含量。  進口分裝  十一烷(standard for GC,≥99.5%(GC))  Undecane  :  1120-21-4  質(zhì)量規(guī)格:  standard for GC,≥99.5%(GC)

BeefBrothMedium(withSugar)  進口分裝  香茅醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))   β-Citronellol  :  106-22-9  質(zhì)量規(guī)格:  分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)WFDC2 Others Canine 狗 WAP5 / WFDC2 / HE4 人細胞裂解液 (陽性對照)

人組織細胞淋巴瘤細胞;U937 [U-937]

Wistar大鼠脂肪間質(zhì)干細胞 Wistar rat adipose mesenchymal stem cells

SW038-C2-tk細胞,轉(zhuǎn)染了tk基因的SW038-C2細胞 副溶血性弧菌 人臍靜脈平滑肌細胞RNAHUVSMC miRNA5 μg

SK-N-MC(人神經(jīng)上皮瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

Hep 3B(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0434SC-1(小鼠胚胎細胞)5×106cells/瓶×2 人腎小管上皮細胞;HKC

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