使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏，還具有以下特點：
1.  即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單。
2.  預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3.  本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分：

技術(shù)原理：

       DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

抗生素5號250g用于檢定菌種培養(yǎng)

玫瑰紅鈉瓊脂 250(g) incubation media 玫瑰紅鈉瓊脂 250(g)

沙氏液體培養(yǎng)基 250g 用于真菌的增菌培養(yǎng)，還用于一次性使用衛(wèi)生用品真菌定性檢測

細(xì)菌瓊脂粉250培養(yǎng)基原材料，培養(yǎng)基凝固劑incubationmedia細(xì)菌瓊脂粉250培養(yǎng)基原材料，培養(yǎng)基凝固劑

WILKINS-CHALGREN瓊脂 250g 用于厭氧菌的分離培養(yǎng)Tris(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxybenzyl) isocyanurate  抗氧劑 3114  27676-62-6

Trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate  *磺酸*基硅酯  27607-77-8

Ethyl 4,4,4-trifluoroacetoacetate  三乙酰乙酸乙酯  372-31-6

METHYL TRIFLUOROPYRUVATE  三丙酸甲酯  13089-11-7IL12A Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞cDNAHSkMSC cDNA

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5 (含100mL 酶解緩沖液) 10mL

細(xì)胞名稱 種屬

AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
犬新孢子蟲PCR檢測試劑盒CysteineDiluent

PALCAM Medium Base incubation media PALCAM Medium Base

丙酮丁醇梭菌(丙酮丁醇桿菌) 利用玉米原料生產(chǎn)丙酮丁醇 支/瓶

含225mlFB質(zhì)袋用于李氏菌前增菌培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))

普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(pH8.0-8.2) 250g 分離培養(yǎng)霍亂弧菌，檢定用GVPCAgarBase  進(jìn)口分裝  氘代苯-D6(0.5ml x 10 )  Benzene-D6  ：  1076-43-3    質(zhì)量規(guī)格：  D,99.5%

瓷珠菌種保存管（50支）50支/盒用于菌種保存（瓷珠法）  進(jìn)口分裝  二硫化碳(色譜級)  Carbon disulfide  ：  75-15-0  質(zhì)量規(guī)格：  for HPLC,≥99.9%

雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液（含小倒管）10ml*20支/包用于大腸菌群、大腸桿菌的測定  進(jìn)口分裝  三乙醇胺(色譜級)  Triethanolamine  ：  102-71-6  質(zhì)量規(guī)格：  for HPLC,>99.0%(GC)

0.85%無菌鹽水（10ml/支）10ml/支*20用于樣品稀釋處理  進(jìn)口分裝  四正丁基化銨[離子對色譜級]  IPC-TBA-Cl  ：  1112-67-0  質(zhì)量規(guī)格：  離子對色譜用試劑ASGR1 Others Human 人 ASGPR1 / ASGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0159MLTC-1(小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠肝實質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 CT26.WT mouse colon cancer cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

LIF Protein Human 重組人 LIF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RKO-AS45-1(人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 6T-CEM(T細(xì)胞白血病)

產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。