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HK-2人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞

參  考  價:2500
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

1×106 2500元 15瓶可售

更新時間:2024-05-30 12:02:26瀏覽次數(shù):105次

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貨號 XG-X3343 生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣 用途 僅供科研研究實驗
HK-2人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品:大鼠肝星狀細胞大鼠睪丸間質(zhì)細胞大鼠睪丸支持細胞大鼠骨骼肌成纖維細胞大鼠骨骼肌細胞大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞大鼠骨髓單核細胞大鼠骨髓基質(zhì)細胞大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞

一、細胞基本屬性

細胞名稱

HK-2人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞

細胞別稱

Hk-2; HK2; Human Kidney-2

種屬來源

商品貨號

XG-X3343

 

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

生長培養(yǎng)基 MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

背景描述 HK-2細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞,通過導(dǎo)入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7轉(zhuǎn)染外生包裝細胞Psi-2;Psi-2細胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA317,最后將PA317細胞產(chǎn)生的病毒顆粒導(dǎo)入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉su抗性,但未用G418篩選轉(zhuǎn)導(dǎo)克隆。Southern和FISH分析顯示,HK-2細胞來源于單克隆。PCR檢測證實,HK-2細胞基因組中含有E6/E7基因。

年齡(性別) 成年

組織來源 腎,皮質(zhì)/近端小管

細胞類型 轉(zhuǎn)化細胞系

生物安全等級 2

受體表達情況 epidermal growth factor (EGF), expressed

基因表達情況 alkaline phosphatase; gamma glutamyltranspeptidase; leucine aminopeptidase; acid phosphatase; cytokeratin; alpha 3, beta 1 integrin; fibronectin

保藏機構(gòu) ATCC; CRL-2190 BCRC; 60097

HK-2人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞 

二、細胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主

將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

a、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;

b、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

c、棄上清,沉淀細胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

d、待細胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進行換液培養(yǎng)或傳代。

3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;

a、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;

b、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

c、用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

d、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。

HK-2人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞 

 

三、培養(yǎng)注意事項

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后次傳代建議 1:2 傳代 。

9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:

兔氣管上皮細胞

人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA檢測試劑盒

小鼠臍靜脈內(nèi)皮細胞

雞白介su2(IL-2)試劑盒ELISA

小鼠三叉神經(jīng)元細胞

大鼠白介su1(IL-1)ELISA Kit

小鼠神經(jīng)干細胞

諾沃克病毒RT-PCR試劑盒

小鼠氣管平滑肌細胞

狄斯瓦螨PCR試劑盒

小鼠氣管上皮細胞

桿狀巴爾通體PCR檢測試劑盒

小鼠前列腺成纖維細胞

牛巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒

小鼠前列腺平滑肌細胞

斑石鯛虹彩病毒PCR試劑盒

小鼠前列腺上皮細胞

豬痢疾短螺旋體PCR試劑盒

小鼠前脂肪細胞

豬薩佩羅病毒PCR檢測試劑盒

小鼠全骨髓細胞

白蛉熱西西里病毒PCR檢測試劑盒

小鼠乳腺成纖維細胞

白水河病毒PCR檢測試劑盒

小鼠乳腺上皮細胞

豬皰疹病毒型PCR檢測試劑盒

小鼠軟骨細胞

HK-2人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞殺蠣包拉米蟲PCR檢測試劑盒

小鼠腮腺細胞

游離蛋白SELISA試劑盒

 


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