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當前位置:上海西格生物科技有限公司>>細胞系>>人細胞系>> ME-180人子宮頸表皮癌細胞
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1×106 1500元 15瓶可售
更新時間:2024-05-30 12:59:13瀏覽次數(shù):91次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線貨號 | XG-X3431 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
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細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
一、細胞基本屬性
細胞名稱 | ME-180人子宮頸表皮癌細胞 |
細胞別稱 | Me-180; ME 180; ME180 |
種屬來源 | 人 |
商品貨號 | XG-X3431 |
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
生長培養(yǎng)基 McCoy's 5A+10% FBS+1% P/S
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
背景描述 ME-180細胞來源于一個細胞集落不規(guī)則沒有顯著角質(zhì)化的侵染性鱗狀細胞癌。單層培養(yǎng)的ME-180細胞間可以觀察到帶狀連接,也注意到有細胞質(zhì)張力絲。1970年,發(fā)現(xiàn)支原體污染并去除。TNF-α抑制ME-180細胞的生長;ME-180細胞含有人乳頭瘤病毒DNA,與HPV-39的同源性高于HPV-18。
年齡(性別) 女;66歲
組織來源 宮頸表皮樣癌網(wǎng)膜轉(zhuǎn)移灶
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 宮頸癌細胞
生物安全等級 2
倍增時間 ~36 hours
致瘤性 Yes, in nude mice; forms well differentiated epidermoid carcinoma (grade I).
抗原表達情況 Blood Type A; Rh+; HLA A1, A11, B5(+/-), B40
基因表達情況 Oncogenes: p53+; pRB+
保藏機構(gòu) ATCC; HTB-33
二、細胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
b、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
c、棄上清,沉淀細胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
d、待細胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
b、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
c、用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
d、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
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