實(shí)驗(yàn)原理：
是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法：
1、   血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、   血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、   細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘除顆粒和聚合物。
4、   組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
5、   保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

標(biāo)本要求：
1. 血清：：溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
3. 尿液：無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。
下面就一些常見(jiàn)ELISA操作過(guò)程中的問(wèn)題一一分析。
1．樣品稀釋 酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng)，如果血清不稀釋，不可避免會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng)，出現(xiàn)假陽(yáng)性。因此，國(guó)外檢測(cè)血清抗體的試劑盒，均規(guī)定將血清稀釋至適當(dāng)?shù)谋稊?shù)，以降低非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來(lái)。一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過(guò)大量試驗(yàn)確定，以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性。但是，有些用戶未能?chē)?yán)格按使用說(shuō)明書(shū)操作，如某些產(chǎn)品應(yīng)取10μl樣品進(jìn)行稀釋，個(gè)別用戶取5μl甚至1μl樣品進(jìn)行稀釋，由于吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠，因此造成樣品稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)確，檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)問(wèn)題。
2．試劑盒平衡 試劑盒中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗(yàn)前平衡至室溫（約25℃），一般需在室溫放置20～30分鐘以上。平衡時(shí)間太短會(huì)造成試劑混勻不夠，樣品孵育時(shí)間相對(duì)縮短，ELISA反應(yīng)不夠充分。冬季室溫低，可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。 
3．樣品和試劑的混勻 稀釋前、后的樣品必須充分混勻，所有試劑在加樣前也須搖勻，以保證試驗(yàn)的均一性。
下列是公司是正在的產(chǎn)品：
大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠胰島素自身抗體(IAA)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠載脂蛋白H(ApoH)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠β內(nèi)啡肽受體(βEPR)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK 2)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠肝脂酶(HL)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠煙堿型乙酰受體(NAChR)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠毒蕈堿型乙酰受體(MAChR)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠活化蛋白C(APC)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠α葡萄糖苷酶(αglucosidase)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠Toll樣受體9(TLR9/CD289)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠前列腺素F2α(PGF2α)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠白三烯E4(LTE4)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠(UK)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠血管生成素4(ANG4)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠雄激素(androgen)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠骨成型蛋白4(BMP4)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠骨成型蛋白2(BMP2)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠白介素2(IL2)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠白介素1α(IL1α)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠白介素18(IL18)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠白介素10(IL10)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF2)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠血管生成素1(ANG1)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠白介素9(IL9)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF1)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL) elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGFD)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)

Western Blot封閉液2（奶粉，pH7.5）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
哺乳動(dòng)物蛋白抽提試劑（可提供標(biāo)記服務(wù)）
過(guò)硫酸銨（APS）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
0.5M EDTA (PH8.0)（可提供標(biāo)記服務(wù)）
Streptavidin-HRP（IHC工作液）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
Western洗滌液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
酵母蛋白抽提試劑（可提供標(biāo)記服務(wù)）
考馬斯亮藍(lán)G250（可提供標(biāo)記服務(wù)）
1%鹽酸酒精（可提供標(biāo)記服務(wù)）
DAB顯色試劑盒（20×）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
Western二抗稀釋液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
組織蛋白抽提試劑（可提供標(biāo)記服務(wù)）
考馬斯亮藍(lán)R250（可提供標(biāo)記服務(wù)）
ELISA終止液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
AEC顯色試劑盒（20×）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
蛋白印跡膜再生液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
植物蛋白抽提試劑（可提供標(biāo)記服務(wù)）
ELISA包被液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒（40×）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
Western Blot內(nèi)參陽(yáng)性對(duì)照（可提供標(biāo)記服務(wù)）
包涵體蛋白溶解液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
0.5M DTT（可提供標(biāo)記服務(wù)）
ELISA血清封閉液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
單組份BCIP/NBT顯色試劑（可提供標(biāo)記服務(wù)）
PVDF膜（0.22μm）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠胰島素自身抗體(IAA)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠載脂蛋白H(ApoH)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠β內(nèi)啡肽受體(βEPR)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK 2)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠肝脂酶(HL)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠煙堿型乙酰受體(NAChR)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠毒蕈堿型乙酰受體(MAChR)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠活化蛋白C(APC)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠α葡萄糖苷酶(αglucosidase)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠Toll樣受體9(TLR9/CD289)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠前列腺素F2α(PGF2α)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠白三烯E4(LTE4)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠(UK)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠血管生成素4(ANG4)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠雄激素(androgen)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠骨成型蛋白4(BMP4)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠骨成型蛋白2(BMP2)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠白介素2(IL2)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠白介素1α(IL1α)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠白介素18(IL18)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠白介素10(IL10)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF2)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠血管生成素1(ANG1)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠白介素9(IL9)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF1)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL) elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGFD)elisa kits試劑盒 免費(fèi)代測(cè)

SDS（可提供標(biāo)記服務(wù)）
1M Tris-Cl (pH7.5)（可提供標(biāo)記服務(wù)）
改良型蘇木素（可提供標(biāo)記服務(wù)）
PVDF膜（0.45μm）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
PMSF (100mM)（可提供標(biāo)記服務(wù)）
10% SDS（可提供標(biāo)記服務(wù)）
蛋白酶抑制劑混合物（100×）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
TEMED（可提供標(biāo)記服務(wù)）
檸檬酸鹽緩沖液（100×，pH6.0）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
細(xì)胞消化液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
EDTA緩沖液（50×，pH9.0）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
顯影定影試劑盒（可提供標(biāo)記服務(wù)）
磷酸酯酶抑制劑（100 mM）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
（可提供標(biāo)記服務(wù)）
封閉用正常山羊血清（可提供標(biāo)記服務(wù)）
X線暗盒（可提供標(biāo)記服務(wù)）
Tris（三羥甲基氨基甲烷）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
內(nèi)源性過(guò)氧化物酶封閉液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
X光膠片（可提供標(biāo)記服務(wù)）
內(nèi)源性堿性磷酸酶封閉液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
Jurkat全細(xì)胞裂解液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
293T全細(xì)胞裂解液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
免疫組化抗體稀釋液（綠色）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
MOLT-4全細(xì)胞裂解液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
Biotin標(biāo)記抗體稀釋液（黃色）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
K562全細(xì)胞裂解液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
HRP標(biāo)記抗體稀釋液（紅色）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
COLO全細(xì)胞裂解液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
多聚賴氨酸（10×）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
CTACK/CCL27檢測(cè)試劑盒EL-4全細(xì)胞裂解液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
APES（50×）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
NIH3T3全細(xì)胞裂解液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
防脫載玻片（可提供標(biāo)記服務(wù)）
測(cè)定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。