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血清的幾點樣本處理

時間:2020/9/9閱讀:5146
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血清樣本處理:

   1、血清細胞培養(yǎng)上清

血清細胞培養(yǎng)上清到離心管,1000×g離心20min,除去細胞碎片及雜質(zhì),取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。

    2、血清細胞裂解液

    1)吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,用消化血清細胞,加適量培養(yǎng)基將細胞從培養(yǎng)板上吹下來。懸浮細胞可省略。

    2)收集血清細胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預冷的PBS潤洗3次。

    3)加入適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通常6孔板一個孔的細胞量需要150~250μL PBS重懸。

    4)將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,反復凍融幾次,使細胞充分裂解。也可將樣品進行超聲破碎,以達到裂解的目的。

    3、血清

   血清血清是zui常用于ELISA試劑盒檢測的一類樣本,處理也比較簡單。
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過夜,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
采血過程中應避免溶血,因為紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質(zhì),在以HRP為標記的ELISA試劑盒檢測中會有非特異性的顯色,而導致檢測的不準確性。同時也應避免細菌污染,因為菌體內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP從而導致檢測的假陽性。

    4、血漿

    用含血清的或離心管采集血液標本,標本采集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。
常用的抗凝劑為EDTA、和等,檢測時還應仔細閱讀試劑盒說明書,檢查試劑盒是否對抗凝劑有特殊要求。

氟胺氰菊酯 標準品  :102851-06-9 250mg

滅菌丹 標準品  :133-07-3 250mg

氟磺胺草醚 標準品  :72178-02-0 100mg

甲酰胺黃隆 標準品  :173159-57-4 100MG

氯吡脲 標準品  :68157-60-8 100mg

伐蟲脒鹽酸鹽 標準品  :23422-53-9 250mg

安果 標準品  :2540-82-1 250mg

Fosetyl-aluminum 標準品  :39148-24-8 250mg

Fosfomycin Calcium 標準品  :25992-22-7 100mg

唑磷 標準品  :98886-44-3 30mg

四氯苯酞標準品  : 87-41-2 100mg

呋線威 標準品  :65907-30-4 250mg

Gentamycin-2,5-sulfate hydrate 標準品  :1405-41-0 250mg

赤霉素 標準品  :28281 100mg

Gibberellin A3標準品  : 28281 250mg

血清中除了包被外,一般需進行45加樣。在定性測定中有時不強調(diào)加樣量的準確性,例如規(guī)定為加樣一滴。此時應該使用相同口徑的滴管,保持準確的加樣姿勢,使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中則加樣量應力求準確。標本和結(jié)合物的稀釋液應按規(guī)定配制。加樣時應將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出現(xiàn)氣泡。

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