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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>微生物常用的幾種載體保存法
微生物載體保存法是將微生物吸附在適當(dāng)載體上進(jìn)行干燥保存的方法,常用的有以下幾種方法:
1. 土壤保存法
主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌種的保藏。方法是在滅菌的土壤中加入菌液,立即在室溫下進(jìn)行干燥或使菌體繁殖后再干燥,然后冷藏或在室溫下密封保存。保存用的土壤原則上以肥沃的耕土為宜,土壤需風(fēng)干、粉碎、過篩和滅菌。
使微生物在土壤中繁殖后進(jìn)行干燥保存的方法是:取適量土壤(5克)置于塞有棉塞的試管中,加水或加入充分稀釋的液體培養(yǎng)基(以含水量為土壤最大持水量的60%為宜),然后高壓滅菌。再將需保存的微生物進(jìn)行大量接種,培養(yǎng)至菌絲能用肉眼確認(rèn)的程度為止,移入干燥器中經(jīng)短時(shí)間干燥或風(fēng)干后密封,冷藏或室溫保存。
2.砂土保存法
取清潔的砂,過60目篩去掉大砂粒,并用磁鐵吸去砂中鐵屑,再用NaOH溶液、10% HCl溶液和水交替清洗數(shù)次,干燥后,置于試管或安瓶管中保持2~3cm深,再經(jīng)干熱滅菌后,加入1ml菌種培養(yǎng)液,經(jīng)充分混勻后,放入真空干燥器中,*干燥后熔封保存。也可用二份洗凈的砂(經(jīng)HCl預(yù)處理)和一份貧瘠、過篩的黃土攙和后滅菌,再進(jìn)行菌種保藏。
3.硅膠保存法
以6~16目的無色硅膠代替砂子,干熱滅菌后,加入菌液。加菌液時(shí),由于硅膠的吸附熱常使溫度升高,因而需設(shè)法加以冷卻。
4.磁珠保存法
將菌液浸入素?zé)胖?或多孔玻璃珠)后再進(jìn)行干燥保存的一種方法。在螺旋口試管中裝入1/2管高的硅膠(或無水CaSO4),上鋪玻璃棉,再放上10~20粒磁珠,經(jīng)干熱滅菌后,接入菌懸液,最后冷藏、室溫保藏或減壓干燥后密封保藏。本法對(duì)酵母菌很有效,特別適用于根瘤菌,可保存長達(dá)兩年半時(shí)間。
5.麩皮保存法
在麩皮內(nèi)加入60%的水,經(jīng)滅菌后接種培養(yǎng),最后干燥保藏。
6.紙片(濾紙)保存法
將滅菌紙片浸入培養(yǎng)液或菌懸液中,常壓或減壓干燥后,置于裝有干燥劑的容器內(nèi)進(jìn)行保存。
寄主保存法
微生物侵入其寄主后加以保存的方法。
冷凍保存法
適用于抗凍力強(qiáng)的微生物。這些微生物可在其菌體細(xì)胞外遭受凍結(jié)的情況下而不受損傷,而對(duì)其它大多數(shù)微生物而言,無論在細(xì)胞外凍結(jié)還是在細(xì)胞內(nèi)凍結(jié),都會(huì)對(duì)菌體造成損傷。
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