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伊萊博生物科技（上海）有限公司
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更新時間：2025-07-02 13:44:37瀏覽次數(shù)：91
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一、小鼠腫瘤模型構(gòu)建類型選擇
| 模型類型 | 適用研究 | 周期 | 優(yōu)缺點(diǎn) |
|---|---|---|---|
| 移植瘤模型 | 藥物篩選、免疫治療 | 2-6周 | 操作簡單，但微環(huán)境不完整 |
| 基因工程模型（GEMM） | 腫瘤發(fā)生機(jī)制、靶向治療 | 3-12個月 | 自發(fā)成瘤，接近人類腫瘤但成本高 |
| 化學(xué)/物理誘導(dǎo) | 環(huán)境致癌機(jī)制 | 2-6個月 | 多階段成瘤，適合特定癌種（如肝癌、肺癌） |
二、小鼠腫瘤模型構(gòu)建移植瘤模型（皮下/原位）
1. 細(xì)胞來源
細(xì)胞系：4T1（乳腺癌）、B16-F10（黑色素瘤）、HCT116（結(jié)腸癌）等。
患者來源異種移植（PDX）：將患者腫瘤組織移植至免疫缺陷鼠（NSG小鼠）。
2. 操作步驟（皮下移植）
細(xì)胞準(zhǔn)備：
對數(shù)生長期細(xì)胞，胰mei消化后PBS重懸（活力＞90%）。
調(diào)整濃度：1×10?~1×10? cells/mL（根據(jù)細(xì)胞類型調(diào)整）。
接種：
小鼠腋下或背部皮下注射100-200μL細(xì)胞懸液（27G針頭）。
監(jiān)測：
每2-3天測量腫瘤長徑（L）和短徑（W），體積公式：V = 0.5×L×W2。
終點(diǎn)：腫瘤體積≥1000mm3或出現(xiàn)潰瘍。
3. 原位移植（以肝癌為例）
手術(shù)暴露肝臟：麻醉后左肋下切口，暴露肝左葉。
注射細(xì)胞：緩慢注入50μL HepG2細(xì)胞懸液（5×10? cells）。
縫合監(jiān)測：術(shù)后鎮(zhèn)痛，4周后Micro-CT評估腫瘤負(fù)荷。
三、基因工程自發(fā)模型（以KPC胰腺癌模型為例）
1. 轉(zhuǎn)基因小鼠
品系：LSL-Kras?12?/+; Trp53?1?2?/+; Pdx1-Cre（KPC模型）。
誘導(dǎo)：Cre重組酶激活突變基因，胰腺自發(fā)成瘤（8-12周）。
2. 監(jiān)測
超聲：檢測胰腺腫塊（≥3mm為陽性）。
血清標(biāo)志物：CA19-9（胰腺癌）、AFP（肝癌）。
四、化學(xué)誘導(dǎo)模型（以DEN誘導(dǎo)肝癌為例）
Day 1：
14日齡小鼠腹腔注射二乙基亞硝胺（DEN，25 mg/kg）。
Week 6-8：
飼喂含0.05%二乙基己xi雌酚（DEN-promoter）飼料。
Week 20-30：
解剖觀察肝腫瘤結(jié)節(jié)，計(jì)數(shù)并測量大小。
五、關(guān)鍵評估方法
1. 影像學(xué)
小動物超聲：高頻探頭（≥30MHz）測腫瘤血流信號。
活體熒光成像（IVIS）：適用于熒光標(biāo)記細(xì)胞（如Luciferase）。
2. 病理學(xué)
HE染色：評估腫瘤分化程度、壞死區(qū)域。
免疫組化：Ki67（增殖）、CD31（血管生成）、TUNEL（凋亡）。
3. 免疫微環(huán)境分析
流式細(xì)胞術(shù)：檢測腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞（CD8+ T細(xì)胞、Treg）。
