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伊萊博生物科技（上海）有限公司
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更新時間：2025-07-11 09:22:23瀏覽次數(shù)：36
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一、PDOX模型構(gòu)建的核心優(yōu)勢
| 對比項 | PDOX模型 | 傳統(tǒng)CDX模型（皮下移植） |
|---|---|---|
| 移植部位 | 原發(fā)腫瘤解剖位置（如肺、肝） | 皮下 |
| 微環(huán)境保真度 | 高（保留血管、基質(zhì)相互作用） | 低（缺乏器官特異性TME） |
| 轉(zhuǎn)移能力 | 可自發(fā)轉(zhuǎn)移（模擬臨床過程） | 極少轉(zhuǎn)移 |
| 應(yīng)用場景 | 精準醫(yī)療、轉(zhuǎn)移機制研究 | 初步藥效評估 |
二、PDOX模型構(gòu)建流程
1. 患者腫瘤樣本獲取與處理
樣本來源：手術(shù)切除或活檢的新鮮腫瘤組織（避免壞死區(qū)域）。
預(yù)處理：
無菌PBS沖洗，去除血液和壞死組織。
切割成1–3 mm3小塊（保留腫瘤基質(zhì)成分）。
可選：短期培養(yǎng)（<24小時）于含生長因子的培養(yǎng)基（如RPMI-1640 + 10% FBS）。
2. 實驗動物選擇
免疫缺陷鼠：
NSG（NOD-scid IL2Rγ?/?）：高度免疫缺陷，支持人源免疫細胞共移植。
NOG（NOD/Shi-scid IL2Rγ?/?）：類似NSG，但更易獲得。
裸鼠（BALB/c nude）：T細胞缺陷，成本低，但移植效率較低。
動物年齡：6–8周齡，雌性（減少雄性激素干擾）。
3. 原位移植手術(shù)
(1) 常見腫瘤類型的移植部位與方法
| 腫瘤類型 | 移植部位 | 手術(shù)方法 |
|---|---|---|
| 肺癌 | 肺 | 開胸直接植入肺實質(zhì)（25G針頭穿刺）或氣管內(nèi)灌注 |
| 肝癌 | 肝左葉 | 腹腔手術(shù)暴露肝臟，縫合固定腫瘤組織 |
| 胰腺癌 | 胰腺 | 開腹后植入胰腺尾部，使用可吸收縫線（如Vicryl）固定 |
| 結(jié)直腸癌 | 盲腸或結(jié)腸壁 | 開腹后縫合腫瘤組織至腸漿膜層 |
| 乳腺癌 | 乳腺脂肪墊 | 第四對乳腺脂肪墊注射腫瘤細胞懸液（需Matrigel混合） |
(2) 手術(shù)關(guān)鍵步驟
麻醉：異f烷吸入麻醉（2–3%誘導(dǎo)，1–2%維持）。
消毒：術(shù)區(qū)剃毛，碘伏+酒精消毒。
移植操作：
微型手術(shù)器械（如眼科剪、鑷）暴露靶器官。
植入腫瘤組織塊（1–2塊/動物），避免血管損傷。
可輔以Matrigel（50%體積比）增強腫瘤定植。
術(shù)后護理：
保暖（37℃墊板），直至動物蘇醒。
鎮(zhèn)痛（布托f諾，1 mg/kg，皮下注射，每日1次，持續(xù)3天）。
監(jiān)測體重（每周2次），傷口感染跡象。
4. 模型驗證與監(jiān)測
成瘤率評估：
影像學(xué)：小動物MRI/CT（肺癌、肝癌）或超聲（胰腺癌）每周1次，監(jiān)測腫瘤體積。
生物發(fā)光成像（BLI）：若使用熒光標記的腫瘤細胞（如Luciferase），可實時定量腫瘤生長。
病理驗證：
移植后4–8周取材，H&E染色對比患者原發(fā)腫瘤的組織學(xué)特征。
免疫組化（IHC）檢測標志物（如Ki-67、CD31評估增殖和血管生成）。
轉(zhuǎn)移檢測：
解剖肺、肝、淋巴結(jié)等常見轉(zhuǎn)移灶，進行組織學(xué)分析。
三、PDOX模型的應(yīng)用場景
1. 個體化藥物篩選
對移植成功的PDOX模型分組，分別給予患者臨床用藥或?qū)嶒炐运幬铮ㄈ绨邢蛑委?、免疫治療）?/p>
評價指標：腫瘤體積變化、生存期延長、轉(zhuǎn)移抑制。
2. 腫瘤微環(huán)境研究
通過單細胞RNA測序（scRNA-seq）分析移植后腫瘤與基質(zhì)的相互作用。
評估人源免疫細胞（如PBMC）共移植后的免疫應(yīng)答。
3. 轉(zhuǎn)移機制探索
比較原位移植與皮下移植模型的轉(zhuǎn)移差異（如EMT標志物表達）。
四、常見問題與解決方案
| 問題 | 可能原因 | 解決方案 |
|---|---|---|
| 移植后無腫瘤生長 | 樣本活性不足/免疫排斥 | 使用新鮮樣本，換用NSG等高免疫缺陷鼠 |
| 動物術(shù)后死亡率高 | 手術(shù)創(chuàng)傷/感染 | 優(yōu)化麻醉和無菌操作，術(shù)后抗生素預(yù)防 |
| 轉(zhuǎn)移率低 | 移植時間不足 | 延長觀察至12–16周，或輔助化療促進轉(zhuǎn)移 |
