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伊萊博生物科技（上海）有限公司
主營產(chǎn)品： 動(dòng)物行為學(xué)檢測(cè),大中小型動(dòng)物實(shí)驗(yàn),細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù) |
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型號(hào)
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所在地
上海市
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更新時(shí)間：2025-06-23 14:17:28瀏覽次數(shù)：71
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一、感染疾病模型構(gòu)建通用原則
病原體選擇：
臨床分離株（貼近人類感染）或?qū)嶒?yàn)室標(biāo)準(zhǔn)株（如大腸桿菌ATCC 25922）。
動(dòng)物選擇：
小鼠（常用）、大鼠、倉鼠、豚鼠或非人靈長類（如HIV研究需人源化小鼠）。
免疫缺陷鼠（如SCID、NSG）用于研究宿主免疫機(jī)制。
感染途徑：
模擬自然感染途徑（如呼吸道、消化道、血液等）。
二、常見感染疾病模型構(gòu)建方法
1. 細(xì)菌感染模型
示例：肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）肺部感染
步驟：
培養(yǎng)細(xì)菌至對(duì)數(shù)生長期（OD600≈0.6），離心后重懸于PBS。
麻醉小鼠，氣管內(nèi)滴注50 μL菌液（1×10^6 CFU，劑量需預(yù)實(shí)驗(yàn)確定）。
監(jiān)測(cè)體重、存活率，24-72小時(shí)后取肺組織進(jìn)行CFU計(jì)數(shù)和病理分析。
關(guān)鍵指標(biāo)：
肺組織細(xì)菌載量（CFU/g）、炎癥因子（IL-1β、TNF-α）、肺水腫（濕/干重比）。
2. 病毒感染模型
示例：流感病毒（H1N1）呼吸道感染
步驟：
病毒擴(kuò)增（MDCK細(xì)胞），測(cè)定TCID50。
麻醉小鼠，鼻內(nèi)接種50 μL病毒液（1×10^3 TCID50）。
每日監(jiān)測(cè)體重，3-7天后取肺組織檢測(cè)病毒載量（qPCR）和病理變化。
注意事項(xiàng)：
需在BSL-2及以上實(shí)驗(yàn)室操作。
使用免疫缺陷鼠時(shí)需降低病毒劑量（如1×10^2 TCID50）。
3. 真菌感染模型
示例：白色念珠菌（Candida albicans）系統(tǒng)性感染
步驟：
培養(yǎng)真菌至對(duì)數(shù)期，PBS洗滌后調(diào)整濃度（1×10^6 CFU/mL）。
尾靜脈注射100 μL菌液（1×10^5 CFU/小鼠）。
觀察生存曲線，取腎臟、脾臟進(jìn)行CFU計(jì)數(shù)和組織病理學(xué)（PAS染色）。
關(guān)鍵點(diǎn)：
免疫抑制小鼠（如環(huán)lin酰胺預(yù)處理）可增強(qiáng)感染表型。
4. 寄生蟲感染模型
示例：瘧原蟲（Plasmodium berghei）血液感染
步驟：
從感染小鼠采血（含蟲紅細(xì)胞），稀釋至1×10^6寄生紅細(xì)胞/mL。
腹腔或尾靜脈注射100 μL（1×10^5寄生紅細(xì)胞）。
每日采血涂片（吉姆薩染色），計(jì)算寄生蟲血癥（感染紅細(xì)胞百分比）。
三、感染途徑選擇
| 途徑 | 適用模型 | 操作要點(diǎn) |
|---|---|---|
| 氣管內(nèi)滴注 | 肺炎球菌、流感病毒 | 需精準(zhǔn)控制劑量，避免窒息。 |
| 鼻內(nèi)接種 | 呼吸道病毒（SARS-CoV-2） | 非侵入性，但部分病毒可能擴(kuò)散至腦部。 |
| 腹腔注射 | 敗血癥模型（大腸桿菌） | 操作簡單，但易引起全身炎癥而非局部感染。 |
| 尾靜脈注射 | 系統(tǒng)性感染（念珠菌、瘧原蟲） | 需熟練操作，避免漏液導(dǎo)致劑量不準(zhǔn)。 |
| 灌胃 | 腸道感染（鼠傷寒沙men氏菌） | 需空腹處理，避免胃酸影響病原體活性。 |
四、表型驗(yàn)證方法
病原體載量：
細(xì)菌/真菌：組織勻漿后CFU計(jì)數(shù)。
病毒：qPCR檢測(cè)病毒核酸或空斑試驗(yàn)。
寄生蟲：顯微鏡計(jì)數(shù)或熒光報(bào)告基因檢測(cè)。
宿主反應(yīng)：
組織病理學(xué)（HE染色、免疫組化）。
炎癥因子（ELISA或流式細(xì)胞術(shù)）。
免疫細(xì)胞浸潤（流式檢測(cè)巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等）。
五、注意事項(xiàng)
生物安全：
根據(jù)病原體危險(xiǎn)等級(jí)（BSL-1至BSL-4）選擇對(duì)應(yīng)防護(hù)措施。
劑量優(yōu)化：
預(yù)實(shí)驗(yàn)確定LD50或ID50，避免動(dòng)物快速死亡或無表型。
對(duì)照設(shè)置：
空白對(duì)照（PBS）、滅活病原體對(duì)照、免疫抑制對(duì)照（如適用）。
倫理終點(diǎn)：
設(shè)定人道終點(diǎn)（如體重下降≥20%需安樂si）。
