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凍干粉標準菌株使用教程
2022-11-30 閱讀(2494)
凍干粉標準菌株使用教程
“標準菌株:由國內(nèi)或國際菌種保藏機構(gòu)保藏的,遺傳學特性得到確認和保證并可追溯的菌株[1]。標準菌株是在給某細菌定名、分類記載和發(fā)表時,為了使定名準確和作為分類概念的準則,以純粹活菌(可繁殖)狀態(tài)所保存的菌種。 標準菌株也稱為模式菌株(type strains),通常需要由至少兩個不同國家的專門保藏機構(gòu)保藏的菌株,一個菌株在同一個保藏機構(gòu)有且僅有永-久保藏號
【冷凍管開封】
用浸過75%酒精的脫脂棉嚴格消毒冷凍管蓋。
【菌株復溶】
無菌環(huán)境中旋開裝有復溶液的滴瓶蓋，吸取1ml 左右復溶液，加入到冷凍管中。輕輕振蕩，使凍干菌
株溶解呈懸浮狀。
【菌株復壯】
用無菌吸管吸取菌懸液，轉(zhuǎn)移到復溶液滴瓶中。做好標識，在適宜溫度下培養(yǎng)。細菌在30-35℃培養(yǎng)
箱中培養(yǎng)24-48h，真菌在20-25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-72h（必要時，可適當延長培養(yǎng)時間）。
【菌株傳代】
將得到的菌株的新鮮培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到適宜的固體培養(yǎng)基及液體培養(yǎng)基中（盡量增大接種量：如用無菌吸
管吸取≥50μl 新鮮培養(yǎng)物至固體培養(yǎng)基，邊移動邊緩慢釋放），適宜溫度下培養(yǎng)，用以菌株的保藏、傳
代及制備工作菌株。
【注意事項】
1、菌種活化前，將冷凍管保存在低溫、清潔、干燥的環(huán)境中，長時間室溫下放置會導致菌種衰退；
2、冷凍管開封、凍干粉復溶、菌株恢復培養(yǎng)等操作應在無菌條件下進行；
3、一些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后，延遲期較長，部分需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長；
4、苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)需采用含特定營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，敬請正確選擇，不清楚時來電詢問；
5、某些厭氧菌的培養(yǎng)，自開封到接種完成，均需以無氧氣體充填，以保持厭氧狀態(tài)；培養(yǎng)過程中亦要保
持厭氧狀態(tài)；
6、某些菌種，如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需要5-10%CO2 促進生長；
7、如發(fā)現(xiàn)冷凍管蓋松動、復溶液渾濁等異常情況，應停止使用對應產(chǎn)品。
8、部分菌種有致病性、擴散性，請專業(yè)人員在專業(yè)環(huán)境下有保護性操作。
【保藏條件】-20℃保存（復溶液于2-25℃保存）
【保藏時間】24 個月，應根據(jù)菌種狀況及時轉(zhuǎn)接
