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葉綠體色素(葉綠素ab和類胡蘿卜素)試劑盒
葉綠體色素(葉綠素ab和類胡蘿卜素)試劑盒
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【簡單介紹】
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葉綠體色素(葉綠素ab和類胡蘿卜素)試劑盒
葉綠體中所含色素主要有兩大類,葉綠素(包括葉綠素 a 和葉綠素 b)和類胡蘿卜素(包 括胡蘿卜素和葉黃素),它們與類囊體膜上的蛋白質(zhì)結(jié)合

葉綠體色素(葉綠素ab和類胡蘿卜素)試劑盒

葉綠體色素(葉綠素ab和類胡蘿卜素)試劑盒

本試劑盒僅供科研使用 1 葉綠體色素含量測定試劑盒說明書 (貨號(hào):WS3160W 微板法 96 ) 一、產(chǎn)品簡介: 葉綠體中所含色素主要有兩大類,葉綠素(包括葉綠素 a 和葉綠素 b)和類胡蘿卜素(括胡蘿卜素和葉黃素),它們與類囊體膜上的蛋白質(zhì)結(jié)合,成為色素蛋白復(fù)合體,其含量 多少及其組成決定了植物對(duì)不同光的吸收、利用效率,常常作為研究光合生理的重要指標(biāo)。 根據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見光譜的吸收,在 649nm 665nm 處測定葉綠素提取物的 吸光值,在 470nm 處測定類胡蘿卜素;然后利用經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算出樣品中葉綠素 a 含量、 葉綠素 b 含量、葉綠素總含量及類胡蘿卜素含量。 二、試劑盒組分與配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 試劑一 粉劑×1 4℃保存 乙醇(自備) 1000mL×1 4℃保存 抽提 Buffer 配制:(體積比)乙醇:蒸餾水=95:5 三、所需的儀器和用品: 酶標(biāo)儀、96 孔板、天平、10mL 玻璃試管、錫箔紙、無水乙醇。 四、葉綠體色素含量的測定: 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí) 驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)! 1、樣本制備 1)取新鮮植物葉片或其它綠色組織,去掉中脈。 2)稱約 0.1g 剪碎,用蒸餾水洗干凈,然后加入 1mL 抽提 Buffer,少量試劑一(約 50mg), 葉綠素對(duì)光敏感,務(wù)必在黑暗或弱光條件下充分研磨(難磨葉片可以添加少量石英砂助 磨),然后轉(zhuǎn)移至 10mL 玻璃試管。 3)用抽提 Buffer 沖洗研缽,將所有沖洗液及研缽中所有的綠色物質(zhì)轉(zhuǎn)入 10mL 玻璃試管, 用抽提 Buffer 補(bǔ)充至 10mL,玻璃試管置于黑暗條件下或者包上錫箔紙浸提 3h,觀察試 管底部組織殘?jiān)?全變白則提取*全,若組織殘?jiān)?全變白,繼續(xù)浸提至其*全變白。 2、上機(jī)檢測 分別取200μL浸提液和200μL抽提Buffer96孔板,記為測定管和空白管,分別于665nm 649nm 470nm 處讀取吸光值 A,△A 665=(A 測定-A 空白) 665,△A 649=(A 測定-A 空白) 649,△A 470=(A 測定-A 空白) 470。 【注】:若吸光值 A 超過 1,待檢測的浸提液用抽提 buffer 稀釋,計(jì)算公式乘以稀釋倍數(shù)。 五、結(jié)果計(jì)算: 葉綠素 a 含量(mg/g 鮮重)=Ca× D W V 1000 ? ? 葉綠素 b 含量(mg/g 鮮重)=Cb× D W V 1000 ? ? 葉綠素總含量(mg/g 鮮重)=CT× D W V 1000 ? ? 類胡蘿卜素含量(mg/g 鮮重)=Cc× D W V 1000 ? ?本試劑盒僅供科研使用 Ca=13.95×A6656.88×A649 (mg/L); Cb=24.96×A6497.32×A665(mg/L)CT=6.63×A665+18.08×A649(mg/L); Cc=(1000×A470-2.05×Ca-114.8×Cb)÷245(mg/L) =(1000×A470-2851.304×A649+811.7385×A665)÷245 (mg/L); V---代表提取液體積,10mL; D---代表稀釋倍數(shù),未稀釋即為 1W---代表樣本質(zhì)量,g2



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