| 上海宇淳生物科技有限公司
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| 參考價 | ￥610 |
-
型號
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
| 24T | 610元 | 1 盒 可售 |
更新時間：2024-06-06 15:32:37瀏覽次數(shù)：198
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土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)試劑盒
土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)試劑盒
本試劑盒僅供科研使用 1 土壤α-葡萄糖苷酶（Solid-α-Glucosidase，S-α-GC）試劑盒說明書 （貨號：WS3130F 分光法 24 樣） 一、產(chǎn)品簡介： 土壤α-葡萄糖苷酶（α-GC，EC 3.2.1.20)在廣泛分布在微生物中，是一類能夠從含有α-糖 苷鍵底物的非還原端催化水解 a-1,4-糖苷鍵，釋放出葡萄糖，該酶與淀粉等糖代謝密切 相關(guān)，在土壤微生物的糖類代謝方面具有重要生理功能。 土壤α-葡萄糖苷酶能夠催化對-硝基苯-α-D 吡喃葡萄糖苷生成黃色物質(zhì)對-硝基*酚 （PNP），該物質(zhì)在 405nm 有特征光吸收，進(jìn)而得到土壤α-葡萄糖苷酶的活性。 二、試劑盒的組成和配制： 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 粉劑 mg×1 瓶 -20℃保存 臨用前加入 4mL 蒸餾水，充分溶解 備用，用不完的試劑仍-20℃保存。 試劑二 液體 15mL×1 瓶 4℃保存 試劑三 液體 18mL×1 瓶 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 粉劑×1 支 4℃保存 若重新做標(biāo)曲，則用到該試劑。 三、所需的儀器和用品： 可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、恒溫振蕩培養(yǎng)箱/水浴鍋、臺式離心機(jī)、 可調(diào)式移液器、天平。 四、土壤α-葡萄糖苷酶（S-α-GC）酶活檢測： 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗 樣本和試劑浪費！ 1、樣本處理： 取新鮮土樣或干土（風(fēng)干或者 37 度烘箱風(fēng)干），先粗研磨，過 40 目篩網(wǎng)備用。 【注】：土壤風(fēng)干，減少土壤中水分對于實驗的干擾；土壤過篩，保證取樣的均勻細(xì)膩； 2、測定步驟： ① 可見分光光度計預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 405nm，蒸餾水調(diào)零。 ② 在 EP 管中依次加入： 試劑名稱（μL） 測定管 對照管 空白管（僅做一次） 土樣（g） 0.05 0.05 試劑一 150 150 蒸餾水 150 試劑二 300 300 300 混勻， 37℃振蕩反應(yīng) 1h 試劑三 350 350 350 混勻，12000rpm 室溫離心 10min，取全部上清液轉(zhuǎn)移至 1mL 玻璃比色 皿(光徑 1cm)中，405nm 下讀取吸光值 A，△A=A 測定-A 對照-A 空白（每 個樣本需做一個自身對照）。 【注】：1.若ΔA 在零附近徘徊，可延長 37℃的孵育時間 T（如增至 4 小時或更長），或增加 土樣質(zhì)量 W（如增至 0.2g）。則改變后的 T 和 W 需代入計算公式重新計算。 2.若測定管 A 值大于 1.5 或△A 大于 1.5，可縮短 37℃的孵育時間 T（如減至 0.5 小時或更短）。 則改變后 T 需代入計算公式重新計算。或?qū)ψ詈笠徊降拇龣z測上清液（包括測定管、對照管本試劑盒僅供科研使用 2 和空白管）同時用蒸餾水進(jìn)行稀釋，稀釋倍數(shù) D 代入計算公式。 五、結(jié)果計算： 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為 y = 0.1461x + 0.0087；x 為標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量（μg），y 為△A。 2、單位定義：每小時每克土樣中產(chǎn)生 1nmol 對-硝基*酚（PNP）定義為一個酶活單位。 S-α-GC 活力(nmol/h/g 土樣)=(ΔA-0.0087) ÷0.1461÷Mr×103÷W÷T×D =49.2×(ΔA-0.0087)÷W×D T---反應(yīng)時間，1h； W---實際稱取土樣質(zhì)量，g； Mr--- PNP 相對分子質(zhì)量，139.11； D---稀釋倍數(shù)，未稀釋即為 1。 附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程： 1 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液（1mg/mL）：向標(biāo)準(zhǔn)品 EP 管里面加入 1mL 蒸餾水。 2 把母液稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5 mg/mL。也可根據(jù)實際 樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 在 EP 管中依次加入：20μL 標(biāo)準(zhǔn)品+130μL 蒸餾水+300μL 試劑二+350μL 試劑三，混 勻，全部上清液轉(zhuǎn)移至 1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）中，于 405nm 下讀取吸光值。 4 根據(jù)結(jié)果制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
