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Fd-谷an酸合成酶(Fd-GOGAT)試劑盒
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Fd-谷an酸合成酶(Fd-GOGAT)試劑盒
α-木糖苷酶(EC 3.2.1.177)是一類木聚糖降解水解酶,存在于植物、細(xì)菌和真菌等生物 體,促使非還原末端α-D-木糖殘基的水解,釋放出α-D-木糖。

Fd-谷an酸合成酶(Fd-GOGAT)試劑盒

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α-木糖苷酶(α- xylosidase)活性測(cè)定試劑盒說明書 (貨號(hào):WS3170F 分光法 24 樣) 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介 : α-木糖苷酶(EC 3.2.1.177)是一類木聚糖降解水解酶,存在于植物、細(xì)菌和真菌等生物 體,促使非還原末端α-D-木糖殘基的水解,釋放出α-D-木糖。 α-木糖苷酶催化對(duì)硝基*酚-α-D-木糖苷產(chǎn)生對(duì)硝基*酚(PNP),該產(chǎn)物在 405nm 有特征吸收峰,通過測(cè)定 405nm 光吸收增加速率,即可計(jì)算α-木糖苷酶活性。 二、試劑盒的組成和配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 提取液 液體 30mL×1 4℃保存 試劑一 粉劑 mg×1 4℃保存 用前甩幾下使試劑落入底部, 再加 2mL 蒸餾水溶解備用。 試劑二 液體 6mL×1 4℃保存 試劑三 27mL×1 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 粉劑×1 4℃保存 若重新做標(biāo)曲,則用到該試劑。 三、所需的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、可調(diào)式移液器、低溫離心機(jī)、天平、 研缽、冰和蒸餾水。 四、α-木糖苷酶活性測(cè)定: 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)! 1、樣本的制備: ① 組織樣本:取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.5g),加入 1mL 提取液,進(jìn)行冰 浴勻漿。12000rpm,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 【注】若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 比例提取。 ② 細(xì)菌或細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì) 胞,加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);12000rpm4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 【注】若增加樣本量,可按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液體積(mL)500~10001 的比例提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè)。若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。 2、上機(jī)檢測(cè): ① 可見分光光度計(jì)預(yù)熱 30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 405nm,蒸餾水調(diào)零。 ② 在 EP 管中依次加入: 試劑名稱(μL測(cè)定管 對(duì)照管 樣本 30 30 試劑一 75 蒸餾水 75 試劑二 135 135 迅速混勻,40℃保溫 20min 試劑三 540 540 混勻,取全部澄清液體轉(zhuǎn)移至 1mL 玻璃比色皿中,于 405nm 處測(cè)定吸光值 A,ΔA=A 測(cè)定-A 對(duì)照(每個(gè)測(cè)定



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