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土壤脂肪酶(S-LPS)試劑盒
土壤脂肪酶(S-LPS)試劑盒
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更新時間:2024-05-31 10:13:56瀏覽次數:289

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【簡單介紹】
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土壤脂肪酶(S-LPS)試劑盒
脂肪酶(EC 3.1.1.3)是一種特殊的酯鍵水解酶,能催化天然油脂水解,,在食品、醫(yī)藥、洗 滌劑和皮革等許多工業(yè)領域中都有廣泛的應用

土壤脂肪酶(S-LPS)試劑盒

土壤脂肪酶(S-LPS)試劑盒

本試劑盒僅供科研使用 1 土壤脂肪酶(S-LPS)活性試劑盒說明書 (貨號:WS8330F 分光法 48 樣) 一、產品簡介: 脂肪酶(EC 3.1.1.3)是一種特殊的酯鍵水解酶,能催化天然油脂水解,,在食品、醫(yī)藥、洗 滌劑和皮革等許多工業(yè)領域中都有廣泛的應用, 本試劑盒提供一種簡單、快速的檢測方法,以對硝基*酚酯作為底物,脂肪酶水解底物 產生具有顏色的對硝基*酚,在405nm波長下測定其吸光值,即可得出脂肪酶活力。 二、試劑盒的組成和配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 A 液:μL×3 B 液:5mL×1 -20℃保存 臨用前甩幾下,使微量 A 液體落到底 部,再向每支 A 液中加入 2mLB 液, 混勻備用,用不完的試劑仍-20℃保存。 試劑二 液體 35mL×1 4℃保存 標準品 粉體 mg×1 4℃保存 若重新做標曲,則用到該標曲。 三、所需的儀器和用品: 可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、可調式移液槍、蒸餾水。 四、土壤脂肪酶(S-LPS)活性測定: 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗 樣本和試劑浪費! 1、樣本制備: 取新鮮土樣或風干(可 37 度烘箱風干)土樣,先粗研磨,過 40 目篩網備用。 【注】:土壤風干,減少土壤中水分對于實驗的干擾;土壤過篩,保證取樣的均勻細膩; 2、上機檢測① 可見分光光度計預熱 30 min,調節(jié)波長到 405 nm,蒸餾水調零。 ② 在 EP 管中依次加入: 試劑名稱(μL測定管 空白管(僅做一次) 土壤樣本(g0.15g 試劑一 80 80 試劑二 680 680 混勻,30℃條件振蕩反應 20min,立即于 4℃,12000rpm 離心 10min,取出全部上清液至 96 孔板中,于 405nm 處讀取吸光值 A,A=A 測定-A 空白。 【注】若ΔA 值在零附近,可以延長反應時間 T(如至 40min 或更長),或增加土壤樣本量 W(如 增至 0.2g),則改變后的反應時間 T 和土壤樣本質量 W 需代入公式重新計算。 五、結果計算: 1、標準曲線方程:y = 0.0182x - 0.0037,x 是標準品摩爾質量(nmol),y 是ΔA。本試劑盒僅供科研使用 2 2、酶活定義:每小時每克土樣釋放出 1nmol 對硝基*酚的酶量定義為一個酶活力單位。 S-LPS(nmol/h/g 干土)=[(A+0.0037)÷0.0182]÷W÷T=164.8×(A+0.0037) ÷W T---反應時間,20 min=1/3hW---土壤樣本實際取樣量,g。 附:標準曲線制作過程: 1 制備標準品母液(20μmol/mL):向標準品 EP 管里面加入 1ml 蒸餾水。 2 把母液稀釋成以下濃度梯度的標準品:0, 0.8, 1.6, 2.4, 3.2, 4μmol/mL。也可根據實際 樣本來調整標準品濃度。 3 96 孔板中加入:20μL 標準品+80μL B +660μL 試劑二,混勻,于 405nm 讀取吸光值,根據結果制作標準曲線。



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