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鈣含量檢測(cè)試劑盒(鄰甲*酞絡(luò)合銅比色法)
鈣含量檢測(cè)試劑盒(鄰甲*酞絡(luò)合銅比色法)
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【簡(jiǎn)單介紹】
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鈣含量檢測(cè)試劑盒(鄰甲*酞絡(luò)合銅比色法)
鈣(Calcium)是一種金屬元素,常溫下呈銀白色晶體,動(dòng)物的骨骼、蛤殼、蛋殼都含 有碳酸鈣。檢測(cè)生命體鈣含量,主要通過(guò)檢測(cè)鈣離子濃度實(shí)現(xiàn)的。

鈣含量檢測(cè)試劑盒(鄰甲*酞絡(luò)合銅比色法)

鈣含量檢測(cè)試劑盒(鄰甲*酞絡(luò)合銅比色法)

本試劑盒僅供科研使用 1 鈣含量(鄰甲酚*絡(luò)合銅比色法)檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) (貨號(hào):WS8121F 分光法 48 樣) 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介: (Calcium)是一種金屬元素,常溫下呈銀白色晶體,動(dòng)物的骨骼、蛤殼、蛋殼都含 有碳酸鈣。檢測(cè)生命體鈣含量,主要通過(guò)檢測(cè)鈣離子濃度實(shí)現(xiàn)的。 本試劑盒利用溶液中鈣離子在堿性條件下能與鄰甲酚*絡(luò)合銅(OCPC)結(jié)合,生成紫 紅色的絡(luò)合物,加入鎂離子螯合劑,去除鎂離子背景干擾。通過(guò)檢測(cè)生成有色絡(luò)合物于 575nm 處的吸光值,即可計(jì)算出總鈣含量。 二、試劑盒組分與配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 22mL×1 4℃保存 試劑二 液體 22mL×1 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 液體 1mL×1 4℃保存 2.5mmol/L 的鈣標(biāo)準(zhǔn)品。 三、所需儀器和用品: 可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、可調(diào)式移液器、離心機(jī)、蒸餾水(無(wú)鈣離子)。 四、鈣含量檢測(cè): 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)! 1、 樣本制備: ① 液體樣品:澄清的液體樣本如血清可直接檢測(cè)。 ② 組織樣本:取約 0.1g 組織樣本,加 1mL 生理鹽水研磨,粗提液全部轉(zhuǎn)移到 EP 管中, 12000rpm,常溫離心 10min,上清液待測(cè)。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取。 ③ 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或 細(xì)胞加入 1mL 生理鹽水,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間 10s,重復(fù) 30 次);12000rpm 離心 10min,取上清待測(cè)。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(104):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 2、上機(jī)檢測(cè): ① 可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱 30min,設(shè)定波長(zhǎng)到 575nm,蒸餾水調(diào)零。 ② 所有試劑解凍至室溫,按照試劑一:試劑二為 1:1 配制反應(yīng) mix4℃避光保存三天)。 ③ 在 1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)中依次加入: 試劑名稱(μL測(cè)定管 標(biāo)準(zhǔn)管 (僅測(cè)一次) 空白管 (僅測(cè)一次) 樣本 10 標(biāo)準(zhǔn)品 10 蒸餾水 10本試劑盒僅供科研使用 2 【注】:1. 測(cè)定管的 A 值若超過(guò) 1.5,可把樣本用蒸餾水稀釋后測(cè)定,稀釋倍數(shù) D 代入計(jì)算公式。 2. A 測(cè)定值接近 A 空白值,則可以增加樣本加樣體積 V1(如增至 50μL,則反應(yīng) mix 760μL;標(biāo)準(zhǔn)管仍為 10μL,蒸餾水 40μL,反應(yīng) mix 760μL;空白管為蒸餾水 50μL, 反應(yīng) mix 760μL),則改變后的 V1 需帶入公式計(jì)算。 五、結(jié)果計(jì)算: 1.按液體體積計(jì)算: 鈣含量(mmol/L)= (C 標(biāo)準(zhǔn)×V 標(biāo))×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)×D =2.5×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)×D 2.按樣本質(zhì)量計(jì)算: 鈣含量(μmol/g)=(C 標(biāo)準(zhǔn)×V 標(biāo))×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷(W×V1÷V)×D =2.5×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷W×D 3、按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算: 鈣含量(nmol/104 cell)=(C 標(biāo)準(zhǔn)×V 標(biāo)) ×103×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷(500×V1÷V)×D =5×(ΔA 測(cè)定-ΔA 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)×D C 標(biāo)準(zhǔn)---鈣標(biāo)品濃度,2.5mmol/L=2.5μmol/mLV 標(biāo)---標(biāo)準(zhǔn)品加入體積,0.005mL; D---稀釋倍數(shù),未稀釋即為 1; V1---加入樣本體積,0.01mL; V---提取液體積,1mLW---取樣質(zhì)量,g; 500---細(xì)胞數(shù)量,萬(wàn)。 反應(yīng) mix 800 800 800 混勻,室溫放置 2min,于波長(zhǎng) 575nm 處讀取各管吸光度 A。



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