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肌酐 (Cr) 含量試劑盒(肌氨酸氧化酶法)
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【簡(jiǎn)單介紹】
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肌酐 (Cr) 含量試劑盒(肌氨酸氧化酶法)
肌酐(Creatinine,CRE)是肌肉代謝的產(chǎn)物,主要通過腎小球?yàn)V過排出體外。在正常情況下, 體內(nèi)肌酐的含量基本穩(wěn)定。

肌酐 (Cr) 含量試劑盒(肌氨酸氧化酶法)

肌酐 (Cr) 含量試劑盒(肌氨酸氧化酶法)

本試劑盒僅供科研使用 1 肌酐(CRE)含量(肌氨酸氧化酶法)檢測(cè)試劑盒說明書 (貨號(hào):WS4021F 分光法 48 樣) 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 肌酐(Creatinine,CRE)是肌肉代謝的產(chǎn)物,主要通過腎小球?yàn)V過排出體外。在正常情況下, 體內(nèi)肌酐的含量基本穩(wěn)定。血液中的肌酐濃度可作為檢測(cè)腎小球?yàn)V過功能的指標(biāo)之一。 本試劑盒利用肌酐酶特異作用于肌酐生成肌酸,肌酸在肌酸酶和肌氨酸氧化酶的相繼作用下 生成過氧化氫,過氧化氫與顯色劑反應(yīng)呈現(xiàn)紫色,該有色物質(zhì)在546nm有吸收峰,進(jìn)而計(jì) 算得到肌酐含量。 二、試劑盒組分與配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 17.5mL×1 4℃保存 試劑二 液體 6mL×1 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)管 粉體 2mg×1 4℃保存 用前甩幾下使粉體落入底部,再加 1mL蒸餾水溶解即標(biāo)準(zhǔn)品濃度為 2mg/mL,再用蒸餾水稀釋401:39份水)成0.05mg/mL,即 442μmol/L的肌酐標(biāo)準(zhǔn)品待檢液。 三、所需儀器和用品: 可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、可調(diào)式移液器、離心機(jī)、蒸餾水。 四、肌酐含量檢測(cè): 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本 和試劑浪費(fèi)! 1、樣本制備: ① 組織樣本: 取約 0.1g 組織樣本,加 1mL 的提取液研磨,粗提液全部轉(zhuǎn)移到 EP 管中,12000rpm,常溫 離心 10min,上清液待測(cè)。 ② 液體樣品:澄清的液體可直接檢測(cè);若渾濁則離心后取上清液檢測(cè)。 2、上機(jī)檢測(cè): ① 可見分光光度計(jì)預(yù)熱 30min,設(shè)置溫度在 37℃,設(shè)定波長(zhǎng)到 546nm。 ② 做實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本,找出適合本次檢測(cè)樣本的稀釋倍數(shù) D。 ③ 所有試劑解凍至室溫,在 1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)中依次加入: 試劑名稱(μL測(cè)定管 空白管 (僅做一次) 標(biāo)準(zhǔn)管 (僅做一次) 樣本 30 蒸餾水 200 230 200 標(biāo)準(zhǔn)品 30 試劑一 350 350 350 混勻,37℃孵育 5min,于 546nm 處讀取吸光值 A1。 試劑二 120 120 120本試劑盒僅供科研使用 2 混勻,37℃孵育 5min 后于 546nm 處讀取吸光值 A2, A=A2-A1。 【注】:1. 測(cè)定管的 A 大于 0.8,須用蒸餾水對(duì)樣本進(jìn)行稀釋,稀釋倍數(shù) D 代入計(jì)算公式。 2. A 的值小于 0.005,可增加樣本加樣體積 V1(如由 30μL 增至 60μL 或更多,則試蒸餾水相 應(yīng)減少,空白管和標(biāo)準(zhǔn)管不變),或增加樣本取樣質(zhì)量 W;則改變后的 V1 W 需代入公式重新 計(jì)算。 五、結(jié)果計(jì)算: 1、按照質(zhì)量計(jì)算: 肌酐含量(nmol/g)=(C 標(biāo)準(zhǔn)×V2)×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷(V1÷V×W)×D =442×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷W×D 2、按照體積計(jì)算: 肌酐含量(μmol/L)=(C 標(biāo)準(zhǔn)×V2)×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷V1×D =442×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)×D C 標(biāo)準(zhǔn)---肌酐標(biāo)品,0.05mg/mL=442μmol/L=442nmol/mLV1---加入樣本體積,0.03mL; V2---加入標(biāo)準(zhǔn)品體積,0.03mLV---提取液體積,1mL; Mr---肌酐分子量,113; W---質(zhì)量,g; D---稀釋倍數(shù),未稀釋即為 1。



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