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查爾酮異構酶(CHI)試劑盒
查爾酮異構酶(CHI)試劑盒
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更新時間:2024-05-27 14:50:59瀏覽次數(shù):335

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【簡單介紹】
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查爾酮異構酶(CHI)試劑盒
查爾酮異構酶(CHI, EC 5.5.1.6)是個被認識的黃酮類化合物合成相關酶,也是黃酮代謝途徑中的關鍵酶之一。

查爾酮異構酶(CHI)試劑盒

查爾酮異構酶(CHI)試劑盒

本試劑盒僅供科研使用 1 查爾酮異構酶(chalcone isomerase,CHI)試劑盒說明書 WS7001F 分光法 48 樣) 一、產(chǎn)品簡介: 查爾酮異構酶(CHI, EC 5.5.1.6)是個被認識的黃酮類化合物合成相關酶,也是黃 酮代謝途徑中的關鍵酶之一。廣泛存在于多種植物中,在植物的抗菌機制、抗脅迫、細 胞的發(fā)育和分化、色素的積累和外源基因的表達等方面起著重要的作用。 查爾酮異構酶(CHI)可使查爾酮形成二氫黃酮,通過檢測查爾酮的初始降解速率進而 得出查爾酮異構酶的酶活性大小。 二、試劑盒組分與配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 提取液 液體 60mL×1 4℃保存 試劑一 液體 30mL×1 4℃保存 試劑二 粉體×2 4℃保存 臨用前離心或甩幾下使試劑落 入底部,每支再分別加 1.2mL 乙醇充分溶解,4℃保存。 三、所需的儀器和用品: 紫外分光光度計、1mL 石英比色皿(光徑 1cm)、臺式離心機、可調(diào)式移液器、研缽、 冰和蒸餾水。 四、查爾酮異構酶(CHI)活性測定: 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗 樣本和試劑浪費! 1、樣本制備: 稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液,進行冰浴勻漿。12000rpm 4℃離心 15min,取上 清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例提取 2、上機檢測: ① 紫外分光光度計預熱 30min 以上,溫度設定 30℃,調(diào)節(jié)波長至 380nm,蒸餾水調(diào)零。 ② 試劑放在 30℃水浴 5min; ③ 按照下表在 1mL 石英比色皿(光徑 1cm)中依次加入試劑: 試劑名稱(μL測定管 樣本 160 試劑一 600 試劑二 40 混勻,30℃條件下,立即于 380nm 讀取吸光值 A1,10min 后讀取 A2【注】:若ΔA 在零附近徘徊,可延長反應時間 T(如:30min 或更長), 或加大樣本量 V1(如增至 240μL,則試劑一相應減少),重新 調(diào)整后的反應時間 T V1 需代入計算公式重新計算。 五、結果計算: 1、按樣本蛋白濃度計算: 酶活單位定義:每毫克組織蛋白每分鐘吸光值變化 0.005 為一個酶活單位(U)。本試劑盒僅供科研使用 2 CHIU/min/mg prot)=(ΔA÷0.005)÷(V1×Cpr) ÷T=125×ΔA÷Cpr 2、按樣本鮮重計算: 酶活單位定義:每克樣本每分鐘吸光值變化 0.01 為一個酶活單位(U)。 CHIU/min/g 鮮重)=(ΔA÷0.005)÷(W×V1÷V) ÷T=125×ΔA÷W V---加入提取液體積,1 mLV1---加入樣本體積,0.16 mLT---反應時間,10 min; W---樣本質(zhì)量,g。 Cpr---樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL,建議使用本公司的 BCA 蛋白含量測定試劑盒;



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