| 上海宇淳生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： PCR八聯(lián)排管,sigma現(xiàn)貨,Cy7試劑 |
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| 參考價(jià) | ￥620 |
-
型號(hào)
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
| 24T | 620元 | 1 盒 可售 |
更新時(shí)間：2024-05-23 14:43:50瀏覽次數(shù)：237
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土壤半纖維素酶/土壤木聚糖酶試劑盒
本試劑盒僅供科研使用 1 土壤半纖維素酶/土壤木聚糖酶試劑盒說(shuō)明書 （貨號(hào)：WS6230F 分光法 24 樣） 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 半纖維素酶主要檢測(cè)木聚糖酶活力，是將木聚糖降解成低聚糖和木糖的一組酶的總 稱，廣泛應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中。 土壤半纖維素酶在酸性環(huán)境下能將木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，進(jìn)一步在沸水浴 條件下與 3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng)，在 540nm 處有特征吸收峰，反應(yīng)液顏色的 深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，通過(guò)測(cè)定反應(yīng)液在 540nm 吸光值增加速率，即可 計(jì)算該酶活力大小。 二、試劑盒組分與配制： 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 50mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 液體 8mL×1 瓶 4℃保存 試劑三 液體 10mL×1 瓶 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 粉劑×1 支 4℃保存 若重新做標(biāo)曲，則用到該試劑 三、所需的儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、可調(diào)式移液器、天平、常溫離心機(jī)、 空氣?。ê銣卣鹗巸x）、水浴鍋。 四、土壤半纖維素酶活性測(cè)定： 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí) 驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本制備： 取新鮮土樣或干土（風(fēng)干或者 37 度烘箱風(fēng)干），先粗研磨，過(guò) 40 目篩網(wǎng)備用。 【注】：土壤風(fēng)干，減少土壤中水分對(duì)于實(shí)驗(yàn)的干擾；土壤過(guò)篩，保證取樣的均勻細(xì)膩； 2、上機(jī)檢測(cè)： ① 可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 540nm，蒸餾水調(diào)零。 ② 在 EP 管中依次加入： 試劑名稱（μL） 測(cè)定管 對(duì)照管 土樣（g） 0.3 0.3 試劑一 600 900 試劑二 300 充分混勻，40℃培養(yǎng) 6 小時(shí)（振蕩培養(yǎng)或間隔一段時(shí)間手動(dòng)振蕩 混勻幾下），12000rpm，25℃離心 10min，上清液待用 ③ 顯色反應(yīng)，在 EP 管中依次加入： 上清液 40 40 試劑三 200 200 混勻，沸水浴（95-100℃，可用封口膜纏緊，防止水分流失） 5min 后，冷卻至室溫， 蒸餾水 800 800 混勻，取 800μL 液體至 1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）中，于 540nm 處讀取吸光值 A，△A=A 測(cè)定管-A 空白管。 【注】：1.若ΔA 較小，可延長(zhǎng) 40℃的孵育時(shí)間 T（如 24 小時(shí)或更長(zhǎng)），或增加土樣質(zhì)本試劑盒僅供科研使用 2 量 W，或增加③歩顯色反應(yīng)步驟中的上清液 V1（如由 40μL 增至 240μL 或更大， 則蒸餾水相應(yīng)減少）。則改變后的 T 和 W 和 V1 需代入計(jì)算公式重新計(jì)算。 2.若測(cè)定管 A 值大于 1.5 或△A 大于 1，③歩顯色反應(yīng)步驟中的上清液可用蒸餾水稀釋， 則稀釋倍數(shù) D 代入公式計(jì)算。 五、結(jié)果計(jì)算： 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：y=11.114x-0.0008，x 是標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量（mg），y 是△A。 2、酶活定義：PH4.8 條件下，每克土壤每天分解木聚糖產(chǎn)生 1mg 還原糖所需的酶量為 一個(gè)酶活單位。 土壤半纖維素酶活力(mg/d/g 土樣)=[(△A+0.0008)÷11.114]×(V2÷V1)÷W÷T×D =8.1×(△A+0.0008)÷W×D V1---顯色反應(yīng)中上清液體積，40μL=0.04mL； V2---反應(yīng)總體積，900μL=0.9mL； T---反應(yīng)時(shí)間，1/4d； W---土壤樣本質(zhì)量，g。 D---稀釋倍數(shù)，未稀釋即為 1。 附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過(guò)程： 1 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液（5mg/mL）：向標(biāo)準(zhǔn)品 EP 管里面加入 1mL 蒸餾水（母液需在兩天 內(nèi)用且-20℃保存）。 2 把母液稀釋成六個(gè)濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 0.6, 1.2, 1.8, 2.4, 3. mg/mL。也可根據(jù)實(shí)際 樣本來(lái)調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 在顯色反應(yīng)階段，按照測(cè)定管加樣表操作，依據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
