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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種

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人胚腎細(xì)胞:293 HEK-293
人胚腎細(xì)胞:293 HEK-293
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更新時(shí)間:2022-04-27 15:00:20瀏覽次數(shù):499

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【簡(jiǎn)單介紹】
貨號(hào) BJ-X96321
人胚腎細(xì)胞:293 [HEK-293] 的相關(guān)產(chǎn)品:Caki-1 (人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞:Caki-1 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶Calu-1 (人肺癌細(xì)胞) 人肺癌細(xì)胞:Calu-1 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶Calu-3 (人肺腺癌細(xì)胞(胸水)) 胸水:Calu-3 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶-3

我司全程提供細(xì)胞生物體、生長(zhǎng)特性、來(lái)源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說(shuō)明書(shū)信息,我們專業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn),讓您實(shí)驗(yàn)再無(wú)煩擾!

產(chǎn)品名稱規(guī)格分類貨號(hào)
人胚腎細(xì)胞:293 [HEK-293] 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系BJ-X96321

商品介紹:

名稱    293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞)


別稱    Hek293; HEK-293; HEK 293; HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293

種屬    人類

年齡(性別)    胎兒

組織來(lái)源    胚胎腎;以腺病毒5DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化

生長(zhǎng)特性    貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)    上皮細(xì)胞樣

背景描述    293 [HEK-293]細(xì)胞是剪切過(guò)的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞,293 [HEK-293]細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報(bào)道中指出,293 [HEK-293]細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過(guò)對(duì)Ad5的插入點(diǎn)的克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn),Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細(xì)胞19號(hào)染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主,可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。

生物安全等級(jí)    2

生長(zhǎng)培養(yǎng)基    MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S

推薦傳代比例    1:3-1:4

推薦換液頻率    2~3次/周

倍增時(shí)間    ~24-30小時(shí)

凍存條件    凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮

培養(yǎng)條件    氣相:空氣,95%;CO?,5%溫度:37℃

致瘤性    Yes, forms tumors in nude mice.

受體表達(dá)情況    vitronectin

注意事項(xiàng)    該細(xì)胞貼壁松散,操作時(shí)請(qǐng)盡量輕柔;換液時(shí)需預(yù)熱培養(yǎng)基;收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團(tuán),為正?,F(xiàn)象,請(qǐng)按照收貨注意事項(xiàng)處理。

98.jpg

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:


一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/p>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);


二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;

適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

22RV1 (人前列腺癌細(xì)胞)     人前列腺癌細(xì)胞:22RV1     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

293T [HEK-293T](人胚腎細(xì)胞)     人胚腎細(xì)胞:293T [HEK-293T]    1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

3T3-L1 (小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)    小鼠胚胎成纖維細(xì)胞:3T3-L1     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

4T1 (小鼠乳腺癌細(xì)胞)     小鼠乳腺癌細(xì)胞:4T1     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

6T-CEM (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)     人T細(xì)胞白血病細(xì)胞:6T-CEM     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

769-P (人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞)     人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞:769-P     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

786-O [786-0] (人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞)     人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞:786-O [786-0]     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

95-D [PLA-801D] (人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞)     人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞:95-D [PLA-801D]     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

A172 (人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)     人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞:A172     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

A2780 (人卵巢癌細(xì)胞)    人卵巢癌細(xì)胞:A2780     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

A-375 (人惡性黑色素瘤細(xì)胞)     人惡性黑色素瘤細(xì)胞:A-375     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

A-431 (人表皮癌細(xì)胞)     人表皮癌細(xì)胞:A-431     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

A549 [A-549] (人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)     人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞:A549 [A-549]     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

A-673 (人橫紋肌肉瘤細(xì)胞)     人橫紋肌肉瘤細(xì)胞:A-673     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

A9 (小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞)    小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞:A9     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

AAV-293 (人胚腎細(xì)胞)     人胚腎細(xì)胞:AAV-293     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

Acc-2 (人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞)    人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞:Acc-2     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

Alpha-Synuclein    核突觸蛋白抗體

beta-Actin (Loading Control)    β-肌動(dòng)蛋白/β-Actin 抗體(內(nèi)參抗體)

beta-Amyloid 1-42 (CT)    β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體

beta Amyloid 1-16    β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體

beta Amyloid 1-28    β淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體

ARIP2a    激活素受體2A抗體

Aquaporin 5    水通道蛋白5抗體

beta Amyloid 1-40    β淀粉樣肽(1-40)抗體

beta Amyloid 1-42    β淀粉樣肽(1-42)抗體

APOA1    載脂蛋白A1抗體

Beta-arrestin 1    β-抑制蛋白1抗體

Ankyrin B    錨定蛋白B抗體

ATP7A    銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)α鏈抗體

Amphetamine(2A3F)

ASMTL    ASMTL蛋白抗體

TRA16    激素受體相關(guān)蛋白16抗體

人胚腎細(xì)胞:293 [HEK-293] beta-Amyloid 1-40 (CT)    β淀粉樣肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗體

ASB13    含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族13抗體

beta Amyloid 31-35    β淀粉樣肽(31-35)/Aβ 31-35 抗體




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