上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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更新時(shí)間:2023-08-05 09:20:24瀏覽次數(shù):395
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng):人T淋巴細(xì)胞系:H9
貨號(hào):BJ-X96815
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類(lèi):細(xì)胞系
商品介紹:
名稱(chēng) H9 (人T淋巴細(xì)胞系) 種屬 人類(lèi) 年齡(性別) 53歲 組織來(lái)源 T淋巴細(xì)胞 生長(zhǎng)特性 懸浮細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣 背景描述 H9細(xì)胞是HuT 78細(xì)胞的克隆系;H9細(xì)胞表面帶有CD3、CD4標(biāo)記。研究表明,H9細(xì)胞對(duì)人體免疫缺陷病毒(HIV-1)敏感,可用于檢測(cè)、分離和增殖HIV-1,也可用于其它人類(lèi)T細(xì)胞病毒的研究。 生物安全等級(jí) 1 生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例 5×10^5-2×10^6cells/ml 推薦換液頻率 2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 注意事項(xiàng) 該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請(qǐng)注意離心收集細(xì)胞懸液;請(qǐng)勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。 保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-176 ECACC; 85050301 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:產(chǎn)品僅用于科研
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Denhardt 溶液,50×100mL 甲酰胺,PCR 級(jí)5mL
鮭魚(yú)精 DNA 溶液1mL 加 T 試劑盒50 次
鯡魚(yú)精 DNA 溶液1mL 加 A 試劑盒50 次
小牛胸腺 DNA 溶液1mL 即用型長(zhǎng)片段 PCR 試劑盒20 次
熒光尺1個(gè) 即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次
大鼠5核苷酸酶(5-NT)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠5'-AMP活化蛋白激酶α-2催化亞基(PRKAA2)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠4-羥基壬烯酸(HNE)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)elisa檢測(cè)試劑盒
人T淋巴細(xì)胞系:H9大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠P選擇素(SELP)elisa檢測(cè)試劑盒
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿(mǎn)37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。