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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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更新時間：2023-06-07 09:50:28瀏覽次數(shù)：170
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4號染色體開放閱讀框29抗體
4號染色體開放閱讀框21抗體
緊密連接蛋白2抗體
緊密連接蛋白7抗體
補體C3cα片段2抗體
商品屬性：
產品名稱：人肝癌細胞：SNU-387
貨號：BJ-X96918
規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類：細胞系
商品介紹：
名稱 SNU-387 (人肝癌細胞) 種屬 人類 年齡（性別） 女性，41歲 組織來源 肝癌 生長特性 貼壁細胞 細胞形態(tài) 上皮細胞樣 背景描述 SNU-387 was derived in 1990 by J.-G. Park and associates from a primary hepatocellular carcinoma taken from a Korean patient who had been treated by transcatheter arterial embolization with lipoidol plus a combination of doxorubicin and mitomycin-C. Tumor cells were initially cultured in ACL-4 medium supplemented with 5% heat-inactivated fetal bovine serum. After establishment, cultures were maintained in RPMI 1640 supplemented with 10% heat inactivated fetal bovine serum. 生物安全等級 2 生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例 1:3-1:6 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~61小時 (PubMed=7543080) 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 保藏機構 ATCC; CRL-2237 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：產品僅用于科研
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
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