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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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更新時間：2023-05-07 09:15:48瀏覽次數(shù)：252
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操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
商品屬性：
產(chǎn)品名稱：人宮頸癌細(xì)胞：Hela 229
貨號：BJ-X96940
規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類：細(xì)胞系
商品介紹：
名稱 Hela 229 (人宮頸癌細(xì)胞) 種屬 人類 年齡（性別） 女性，31歲 組織來源 子宮頸 生長特性 貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣 背景描述 Relatively resistant to polioviruses. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. This cell line can be readily adapted to growth in suspension. 生物安全等級 2 生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1%P/S 推薦傳代比例 1:3-1:8 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~11小時 (JCRB) 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CCL-2.1 CCTCC; GDC0335 ECACC; 86090201 JCRB; JCRB9086 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：產(chǎn)品僅用于科研
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (100-1500 bp)50 次 G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL1 Mu
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (100-5000 bp)50 次 親和硅烷 25mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (300-10000 bp)50 次 親和層析柱6 mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (2)（50-400 bp）50 次 親和層析柱50 mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (2)（300-5000 bp）50 次 親和層析柱30 mL
鹿環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa檢測試劑盒
鹿紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
鹿次氧化酶elisa檢測試劑盒
鹿γ干擾素(IFNG)elisa檢測試劑盒
類人猿elisa檢測試劑盒
人宮頸癌細(xì)胞：Hela 229大鼠α1-酸性糖蛋白(α1AGP)elisa檢測試劑盒
大鼠α1-微球蛋白(α1M)elisa檢測試劑盒
大鼠α1微球蛋白(α1-MG)elisa分析檢測試劑盒
大鼠α1微球蛋白(α1-MG)elisa檢測試劑盒
大鼠α1微球蛋白(α1-MG)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
