上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2022-03-30 10:41:01瀏覽次數(shù):218
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操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
我司提供免費代測服務,凡購買我司試劑盒的用戶,只收取試劑盒的費用,其他輔助試劑全部免費。我們將根據(jù)實驗工作量和難易程度,雙方協(xié)定實驗周期,保質保量完成委托實驗,并將實驗結果和材料用特快專遞免費寄送到您手中。
從標本收集、保存、預試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程提供完整的技術指導。
公司采用的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質量可靠。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
TNF-β腫瘤壞死因子β酶聯(lián)免疫試劑盒 | TNF-β ELISA Kit | CS-1982E |
實驗室注意事項:
1、所有試劑不能與皮膚直接接觸。
2、務必使用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不準用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。
3、取完一種試劑后,應將工具洗凈、擦干后,方可取用另一種試劑。
4、試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處。
5、已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內。
實驗標準品圖:
40 ng/L,5號標準品,150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
20 ng/L,4號標準品,150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
10 ng/L,3號標準品,150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
5 ng/L,2號標準品,150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.5 ng/L,1號標準品,150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
標本的采集與保存:
1、血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
2、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30 分鐘內于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
3、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預冷PBS 進行充分研磨,該過程需在冰上進行(有條件實驗室可選用機器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理(超聲破碎過
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照國家標準進行,已獲得國家承認的“三證",每一個產(chǎn)品都有對應的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
Lysinibacillus sphaericus狂犬病IgM抗體檢測試劑盒
Lysinibacillus sphaericus結合蛋白檢測試劑盒
Lysinibacillus sphaericus狂犬病IgG抗體檢測試劑盒
Lysinibacillus sphaericusIgG Fc片段檢測試劑盒
Lysinibacillus sphaericus登革熱病IgG抗體檢測試劑盒
Lysinibacillus sphaericus登革熱病IgM抗體檢測試劑盒
Lysinibacillus sphaericusVasorin蛋白檢測試劑盒
Lysinibacillus sphaericusT 鈣粘蛋白檢測試劑盒
TNF-β腫瘤壞死因子β酶聯(lián)免疫試劑盒4-羧肼鹽鹽 98%人α2巨球蛋白(α2-MG)免疫試劑盒DHX15蛋白抗體PAPP A2 相關血漿蛋白A2抗體
2-肼鹽鹽 98%人α2-HS糖蛋白(AHSG)抗體免疫試劑盒DIAPH2蛋白抗體PAPK/ALS2CR2 肌側索硬化癥相關蛋白2(2號染色體)抗體
3-肼 99%人α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)免疫試劑盒化蓬亂蛋白2抗體PAP2c/AP2-gamma 脂2C抗體
4-異肼鹽鹽 98%人α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫試劑盒Wnt通路抑制因子2抗體PAP2B 脂2b抗體
3--2-氧吡 97%人α1抗胰糜蛋白(AACT)免疫試劑盒化B淋巴銜接分子DAPP1抗體PAP1/Acid Phosphatase 性抗體
2-氧吡-3- 97%人α1抗胰蛋白(α1-AT)免疫試劑盒化Fas相關死亡結構域蛋白抗體Pan-ras Pan ras抗體
3-氧肼鹽鹽 98%人α1防御素(DEFA1)免疫試劑盒冷休克蛋白DBPA抗體PANK4 泛激4抗體
6-氧吡-3- 98%人α1β糖蛋白(α1β-GP)免疫試劑盒脫帽1A抗體PANK3 泛激3抗體
3-氨-2-氧吡 98%人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)免疫試劑盒清道夫脫帽/熱休克蛋白1抗體PANK2 泛激2抗體
二異乙三氟化氫 95%人Z-DNA結合蛋白1(ZBP1)免疫試劑盒干擾素調節(jié)因子4結合蛋白抗體PANK1 泛激1抗體
3-肼鹽鹽 98%人Wnt-3a蛋白(WNT3A)免疫試劑盒DNA交聯(lián)修復蛋白1C抗體Pancreatic Lipase 胰脂肪抗體
嘧-5- 98%人v-rel禽網(wǎng)狀內皮過多癥病癌因同源物B(RelB)免疫試劑盒化凋亡相關蛋白激2抗體Pancreatic Amylase 胰淀粉抗體
s,s'-烯(p-硫代磺鹽) 97%人vav3核苷交換因子(VAV3)免疫試劑盒凋亡相關蛋白激樣蛋白1抗體pan methyl Lysine 泛賴氨抗體
3-肼鹽鹽 98%人U型肌激,線粒體(CKMT1A)免疫試劑盒化凋亡相關蛋白激1抗體pan 14-3-3 14-3-3蛋白抗體
鄰肼鹽鹽 98%人UV切除修復蛋白RAD23 同源物A(RAD23A)免疫試劑盒牙本質質蛋白1抗體PALB2 癌易感因相關蛋白2