Proteinase K, Molecular Biology Grade

蛋白酶K（分子生物學級別)

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Proteinase K；蛋白酶K（分子生物學級）；Endopeptidase K內(nèi)肽酶K；DNase I脫氧核糖核酸酶I；RNase A核糖核酸酶A；CAS NO：39450-01-6；

產(chǎn)品描述

蛋白酶K，英文名Proteinase K，一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶，pH 4-12的寬廣范圍內(nèi)均有活性，SDS、尿素或EDTA存在條件下也很穩(wěn)定。相對分子量約29.3kDa，能夠切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵，用于生物樣品內(nèi)蛋白質的降解。

蛋白酶K基因來自林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber)，通過酵母重組表達所得，達分子生物學級別。蛋白酶K應用廣泛，主要用于去除DNA和RNA制備中的核酸酶，也可用于非蛋白組分制備體系內(nèi)降解蛋白質雜質，比如DNA疫苗制備、肝素制備等。還可用于制備脈沖電泳的染色體DNA和蛋白質印跡實驗。本品常用工作濃度為50-100µg/ml，根據(jù)緩沖體系是否含SDS、尿素、pH、溫度等因素確定具體的工作濃度。

產(chǎn)品特性

1）   CAS NO：39450-01-6

2）   E.C. NO：3.4.21.64

3）   來源：基因來源林伯氏白色念球菌，酵母重組表達

4）   純度：≥95%，經(jīng)脫色和色譜純化去除RNA和DNA，檢測不到其它雜酶活性。

5）   pH范圍：4.5-12.0，通常使用pH范圍是7.5-9.0

6）   溫度特征：在70℃活性大，建議使用溫度范圍37-70℃

7）   比活力：≥34U/mg protein

8）   單位定義：在37℃，pH7.5的條件下，每分鐘水解酪蛋白生成1µM酪氨酸時需要的酶量，定義為1個活性單位。

9）   激活劑：1-5mM Ca2+【為了活化蛋白酶K活性，加入1-5mM Ca2+。用激活劑優(yōu)化實驗條件能明顯增加酶活性。當加入EDTA去除體系內(nèi)Ca2+會降低酶活性?！?/p>

10）抑制劑：PMSF或DFP（酶可用DFP或PMSF失活，PMSF終濃度5mM。）

11）質量控制：a）以λ DNA為底物，37ºC消化4小時以上，未檢測到脫氧核糖核酸酶活性。b）以λ DNA為底物，25ºC消化16小時以上，未檢測到核糖核酸酶活性。

12）消光系數(shù)：E1%= 14.2 (280 nm, 10 mM NaCl and 5 mM CaCl2, pH 8.0)

13）稀釋緩沖液：推薦 20 mM Tris-HCl (pH 7.4)，1mM CaCl2

14）儲存緩沖液：20 mM Tris-HCl (pH 7.4)，1mM CaCl2，50% Glycerol

注意事項

1）   本蛋白酶K是現(xiàn)有蛋白酶中活性膏的品種，pH活性范圍4-12，溫度范圍為0-75℃，甚至在SDS、尿素或EDTA存在的情況下依舊保持活性。

2）   蛋白酶K末并非無菌，需要長期保存后使用或要求實驗必須無菌，請務bi過濾除菌處理。

3）   為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
 

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Proteinase K 蛋白酶K 分子生物學級工具酶

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