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土壤蔗糖酶檢測(cè)試劑盒資料-齊一生物

時(shí)間:2017-9-18閱讀:719
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土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC)試劑盒說(shuō)明書(shū)
For Research Use Only
僅供研究用
貨號(hào):QYS-235096
分光光度法 50 管/24 樣

土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC)試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定意義:

S-SC 能夠水解蔗糖變成相應(yīng)的單糖而被機(jī)體吸收,其酶促作用產(chǎn)物與土壤中有機(jī)質(zhì)、氮、磷含量,微生物數(shù)量及土壤呼吸強(qiáng)度密切關(guān),是評(píng)價(jià)土壤肥力的重要指標(biāo)。
測(cè)定原理:

S-SC 催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與 3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在 510nm 有特征光吸收,在一定范圍內(nèi) 510nm 光吸收增加速率與 S-SC 活性成正比。
自備用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:甲苯 5mL×1 瓶,4℃保存;(自備)
試劑二:液體 15mL×1 瓶,4℃保存;
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前每瓶加入 40mL 蒸餾水充分溶解備用;用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體 30mL×1 瓶,4℃保存。
土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC)試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定步驟和加樣表:

試劑名稱(chēng)    測(cè)定管        對(duì)照管
                    
風(fēng)干土樣(g)    0.1            0.1
試劑一(μL)    15            15
振蕩混勻,使土樣全部濕潤(rùn),37℃水浴 15min    
試劑二(μL)        250            250
試劑三(μL)        750            
蒸餾水(μL)                    750
                    

充分混勻,放入 37℃水浴培養(yǎng) 24 小時(shí),10000 g,4℃,離心 5min,取上清液

上清液(μL)    200    200
試劑四(μL)    500    500

充分混勻,放入沸水浴中煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),流水冷卻后充分混勻,蒸餾水稀釋 10 倍后(可以吸取 100μL,加入 900μL 蒸餾水稀釋?zhuān)蝗绻舛却笥?4,可以適當(dāng)加大稀釋倍數(shù)),510nm 處蒸餾水調(diào)零,讀吸光值 A。計(jì)算 ΔA=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。


S-SC 活性計(jì)算:

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為 y = 4.9x -0.062;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y 為吸光值。單位的定義:每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為一個(gè) S-SC 活力單位。
S-SC 活力(U /g 土樣)=( ΔA+0.062) ÷4.9×10×V 反總÷W÷T =20.7×(ΔA+0.062) 10:稀釋倍數(shù);T:反應(yīng)時(shí)間,1d; V 反總:反應(yīng)體系總體積:1.015mL;W:樣本質(zhì)量,

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