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齊一生物科技(上海)有限公司

果糖fructose 含量檢測試劑盒資料

時間:2017-9-15閱讀:647
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For Research Use Only

僅供研究用

貨號:QYS-234052
果糖(fructose ,F(xiàn)T)含量試劑盒說明書

分光光度法 50 管/48 樣

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義:

果糖是一種zui為常見的己酮糖,是葡萄糖的同分異構(gòu)體,以游離狀態(tài)大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中,能與葡萄糖結(jié)合生成蔗糖。果糖是zui甜的單糖,廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、保健品生產(chǎn)中。
果糖(fructose ,F(xiàn)T)含量試劑盒說明書測定原理:

在酸性條件下果糖與*反應(yīng),生成有色物質(zhì),在 480nm 下有特征吸收峰。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、蒸餾水

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100ml×1 瓶,4℃保存;
試劑一:1mg/mL 標(biāo)準(zhǔn)液 10mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 40ml×1 瓶,4℃保存;
試劑三:液體 15ml×1 瓶, 4℃保存;
試劑四:粉劑 0.5g×1 瓶,常溫保存。
果糖提?。?/p>

稱取 0.1~0.2g 樣本,常溫研碎;加入 1mL 提取液,適當(dāng)研磨后快速轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中;置于 80℃水浴鍋中 10min(蓋緊,以防止水分散失),振蕩 3~5 次,冷卻后,4000g,25℃離心 10min,取上清;加入少量(約 2mg)試劑四,80℃脫色 30min(蓋緊,以防止水分散失);再加入 1mL 提取液,4000g,25℃離心 10min,取上清液測定。
果糖(fructose ,F(xiàn)T)含量試劑盒說明書測定步驟:

1、 分光光度計預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 480nm,蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測定(在 1.5mL EP 管中依次加入下列試劑):
試劑(μL)    空白管    標(biāo)準(zhǔn)管    測定管
樣本            100
試劑一        100    
蒸餾水    100        
試劑二    700    700    700
試劑三    200    200    200
            

混勻,95℃水浴反應(yīng) 30min(蓋緊,以防止水分散失),冷卻后測定 480nm 處光吸收值,空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測定管分別記為 A1、A2 和 A3。

果糖含量計算:

1、果糖含量(mg/mg prot)=(C 標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)= (A3-A1)÷

(A2-A1) ÷Cpr

果糖(fructose ,F(xiàn)T)含量試劑盒說明書此法需要自行測定蛋白濃度。

2、果糖含量(mg/g 鮮重)=(C 標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(W×V1÷V2)= 2× (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷W。
C 標(biāo)準(zhǔn)管:標(biāo)準(zhǔn)管濃度,1mg/mL;V1:加入樣本體積,0.1mL;V2:加入提取液體積,2mL;

Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g。
注意:zui低檢測限為 100ng/g 鮮重或 1ng/mg prot

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