游離脂肪酸含量(FFA)測(cè)試盒_分光光度法
測(cè)定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
游離脂肪酸,也稱為非酯化脂肪酸,在與白蛋白結(jié)合的血漿中循環(huán)。動(dòng)物血液中的游離脂肪酸 (FFA )含量是一項(xiàng)重要的生理生化指標(biāo)。血清中游離脂肪酸的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān),游離脂肪酸的濃度會(huì)因?yàn)樘悄虿?、重癥肝障礙、甲狀腺功能亢進(jìn)等疾病而上升。
游離脂肪酸含量(FFA)測(cè)試盒_分光光度法
測(cè)定原理:
用有機(jī)溶劑萃取FFA。含有FFA的有機(jī)液與三乙醇胺銅反應(yīng),在有機(jī)相中形成脂肪酸銅 (銅皂) FFA一Cu。Cu離子與顯色液反應(yīng)形成紫紅色絡(luò)合物。反應(yīng)形成的顏色深淺與Cu離子濃度的關(guān)系符合朗伯一比爾定律,因此可利用此反應(yīng)進(jìn)行比色。
自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、離心機(jī)、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿、蒸餾水。
試劑的組成和配制:
萃取液:液體 60 mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體 8 mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體 8 mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,室溫保存;
試劑四:液體18 mL×1瓶,4℃保存;
樣本前處理:
1.動(dòng)物組織:按照動(dòng)物組織質(zhì)量(g):萃取液mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL萃取液),進(jìn)行冰浴勻漿。震蕩提取15min,5000 rpm 4℃離心5min,取有機(jī)相待測(cè)。
2.血清:吸取50 μL血清樣本,加入1 mL萃取液,震蕩提取15 min后,4℃,5000 rpm離心5 min,取有機(jī)相待測(cè)。
3.微生物、細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):萃取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1 mL萃取液)加入萃取液,冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲2秒,間隔3秒,總時(shí)間3min);震蕩提取15 min,然后5000 rpm 4℃離心5min,取有機(jī)相待測(cè)。
注意:有機(jī)相待測(cè)液可能存在于上層,也可能存在于下層,注意觀察,體積較多的那一層即為有機(jī)相待測(cè)液。