常見染色液的配制實驗介紹

實驗步驟

一、呂氏(Loeffler)堿性美藍染液 
A液：美藍(methylene blue) 0．6g
95%酒精 30ml
B液：KOH 0．01g
蒸餾水 100ml
分別配制A液和B液，配好后混合即可。

二、齊氏(Ziehl)石炭酸復紅染色液
A液：堿性復紅(basic fuchsin) 0．3g
95%酒精 10ml
B液：石炭酸 5．0g
蒸餾水 95ml
將堿性復紅在研缽中研磨后，逐漸加入95%酒精，繼續(xù)研磨使其溶解，配成A液。
將石炭酸溶解于水中，配成B液。
混合A液及B液即成。通?？蓪⒋嘶旌弦合♂?—10倍使用，稀釋液易變質(zhì)失效，一次不宜多配。

三、革蘭氏(Gram)染色液
1．草酸銨結(jié)晶紫染液
A液：結(jié)晶紫(crystal violet) 2g
95%酒精 20ml
B液：草酸銨(ammonium oxalate) 0．8g
蒸餾水 80ml
混合A、B二液，靜置48小時后使用。
2．盧戈氏(Lugol)碘液
碘片 1．0g
碘化鉀 2．0g
蒸餾水 300ml
先將碘化鉀溶解在少量水中，再將碘片溶解在碘化鉀溶液中，待碘全溶后，加足水分即成。
3．95%的酒精溶液。
4．番紅復染液
番紅(safranine O) 2．5g
95%酒精 100ml
取上述配好的番紅酒精溶液10ml與80ml蒸餾水混勻即成。

四、芽孢染色液 
1．孔雀綠染液
孔雀綠(malachite green) 5g
蒸餾水 100ml
2．番紅水溶液
番紅 0．5g
蒸餾水 100ml
3．苯酚品紅溶液
堿性品紅 11g
* 100ml
制法取上述溶液10ml與100ml5%的苯酚溶液混合，過濾備用。
4．黑色素(nigrosin)溶液
水溶性黑色素 10g
蒸餾水 100ml
稱取10g黑色素溶于100ml蒸餾水中，置沸水浴中30分鐘后，濾紙過濾
二次，補加水到100ml，加0．5ml甲醛，備用。

五、莢膜染色液 
1．黑色素水溶液
黑色素 5g
蒸餾水 100ml
福爾馬林(40%甲醛) 0．5ml
將黑色素在蒸餾水中煮沸5分鐘，然后加入福爾馬林作防腐劑。
2．番紅染液
與革蘭氏染液中番紅復染液相同。

六、鞭毛染色液 
A液：單寧酸 5g
FeCl3 1．5g
蒸餾水 100ml
福爾馬林(15%) 2．0ml
NaOH(1%) 1．0ml
配好后，當日使用，次日效果差，第三日則不宜使用。
B液：AgNO3 2g
蒸餾水 100ml
待AgNO3溶解后，取出10ml備用，向其余的90mlAgNO3中滴入濃NH4ON，使之成為很濃厚的懸浮液，再繼續(xù)滴加NH4OH，直到新形成的沉淀又重新剛剛?cè)芙鉃橹?。再將備用?0mlAgNO3慢慢滴入，則出現(xiàn)薄霧，但輕輕搖動后，薄霧狀沉淀又消失，再滴入AgNO3，直到搖動后仍呈現(xiàn)輕微而穩(wěn)定的薄霧狀沉淀為止。如所呈霧不重，此染劑可使用一周，如霧重，則銀鹽沉淀出，不宜使用。


七、富爾根氏核染色液
1．席夫氏(Schiff)試劑
將1g堿性復紅加入200ml煮沸的蒸餾水中，振蕩5分鐘，冷至50℃左右過濾，再加入1mol/LHC120ml，搖勻。待冷至25℃時，加Na2S2O5(偏重亞硫酸鈉)3g，搖勻后裝在棕色瓶中，用黑紙包好，放置暗處過夜，此時試劑應(yīng)為淡黃色(如為粉紅色則不能用)，再加中性活性炭過濾，濾液振蕩1分鐘后，再過濾，將此濾液置冷暗處備用(注意：過濾需在避光條件下進行)。
在整個操作過程中所用的一切器皿都需十分潔凈、干燥，以消除還原性物質(zhì)。
2．Schandium固定液
A液：飽和升水溶液
50ml升水溶液加95%酒精25ml混合即得。
B液：冰醋酸
取A液9毫升 B液1毫升，混勻后加熱至60℃。
3．亞硫酸水溶液
10%偏重亞硫酸鈉水溶液5ml，1mol/LHCl5ml，加蒸餾水100ml混合即得。

八、Bouin氏固定液 
苦味酸飽和水溶液 75ml
福爾馬林(40%甲醛) 25ml
冰醋酸 5ml
1g苦味酸可制成75ml飽和水溶液。
先將苦味酸溶解成水溶液，然后再加入福爾馬林和冰醋酸搖勻即成。

九、乳酸石炭酸棉藍染色液
石炭酸 10g
乳酸(比重1．21) 10ml
甘油 20ml
蒸餾水 10ml
棉藍(cottonblue) 0．02g
將石炭酸加在蒸餾水中加熱溶解，然后加入乳酸和甘油，zui后加入棉藍，使其溶解即成。

十、瑞氏(Wright)染色液 
瑞氏染料粉末 0．3g
甘油 3ml
甲醇 97ml
將染料粉末置于干燥的乳缽內(nèi)研磨，先加甘油，后加甲醇，放玻璃瓶中過夜，過濾即可。

十一、美藍(Levowitz-Weber)染液 (實驗62)
在52ml95%酒精和44ml四氯乙烷的三角燒瓶中，慢慢加入0．6g氯化美藍(met hylene blue chloride)，旋搖三角燒瓶，使其溶解。放5—10℃下，12—24小時，然后加入4ml冰醋酸。用質(zhì)量好的濾紙如WhatmanNo．42或與之同質(zhì)量的濾紙過濾。貯存于清潔的密閉容器內(nèi)。