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上海隆壘生物科技有限公司

MTT溶液的配制方法

時間：2013-10-12閱讀：852
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MTT溶液的配制方法
 

通常，此法中的MTT 濃度為5mg/ml。因此，可以稱取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸緩沖液（PBS）或無酚紅的培養(yǎng)基中，用0.22μm濾膜過濾以除去溶液里的細菌，放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的過程中，容器用鋁箔紙包住。

 
需要注意的是，MTT法只能用來檢測細胞相對數(shù)和相對活力，但不能測定細胞數(shù)。在用酶標儀檢測結(jié)果的時候，為了保證實驗結(jié)果的線性，MTT 吸光度在0-0.7 范圍內(nèi)。
 
MTT一般現(xiàn)用現(xiàn)配，過濾后4℃避光保存兩周內(nèi)有效，或配制成5mg/ml保存在-20度長期保存，避免反復凍融，小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分裝在EP管里，用的時候現(xiàn)配，直接往培養(yǎng)板中加，沒必要一下子配那么多,尤其當MTT變?yōu)榛揖G色時就不能再用了。
 
MTT有致癌性，用的時候小心,有條件帶那種透明的簿膜手套.配成的MTT需要無菌，MTT對菌很敏感;往96孔板加時不避光也沒有關(guān)系，畢竟時間較短，或者你不放心的時候可以把操作臺上的照明燈關(guān)掉.
 
配制MTT時用用PBS溶解,也有人用生理鹽水配，60℃水浴助溶。
 
PBS配方：
 
Nacl 8g
 
Kcl 0.2g
 
Na2HPO4 1.44g
 
KH2PO4 0.24g
 
調(diào)pH 7.4
 
定容1L
 

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