16鼠黑色素瘤細(xì)胞。好像這株細(xì)胞還有亞型的,不過(guò)中科院說(shuō)不清,我也就說(shuō)不清了??傊荁16。
細(xì)胞總的來(lái)說(shuō)比較好養(yǎng),操作基本都是常規(guī)的。要求用胎牛10%1640、5%CO2、37度培養(yǎng),一段時(shí)間為了省錢用過(guò)新生牛也不錯(cuò)。但是傳代多了,細(xì)胞有形態(tài)改變??梢詶壍糁匦聫?fù)蘇。血清國(guó)產(chǎn)的杭州四季青,感覺(jué)不滅活比滅活要好養(yǎng)一些。
傳代操作,主要是無(wú)菌操作。細(xì)胞增殖快非常好養(yǎng),但是及時(shí)換液,否則也很容易死亡、或變形。消化用0.25%,可以用含EDTA的,效率更高一點(diǎn)。
消化步驟:棄血清——用D-hank's洗一遍,兩管就夠——加——鏡下觀察邊晃動(dòng)——細(xì)胞開(kāi)始變形即可——棄,不含EDTA者直接加含血清培養(yǎng)基也可——按次序吹打每個(gè)角落2-3遍——鏡下看成單細(xì)胞懸液(否則再吹)——棄去大部分(留1/4—1/8即可)——加適量培養(yǎng)基——繼續(xù)培養(yǎng)。
注意:不提倡據(jù)經(jīng)驗(yàn)按消化時(shí)間來(lái)估計(jì)是否消化*。不同情況下細(xì)胞的消化時(shí)間不同,比如:的活力、的溫度、是否含EDTA、細(xì)胞的活力、細(xì)胞的密度等等。