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上海士鋒生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第14年

13127537090

標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 維生素檢測(cè)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測(cè)培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無菌檢測(cè)培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測(cè)培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測(cè)培養(yǎng)基 化妝品檢測(cè)培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測(cè)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測(cè)培養(yǎng)基 弧菌檢測(cè)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測(cè)培養(yǎng)基 檢測(cè)培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測(cè)培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

轉(zhuǎn)管及轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)

時(shí)間:2014/11/20閱讀:779
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轉(zhuǎn)管培養(yǎng)法(roller tube culture)是Gey 提出的,實(shí)驗(yàn)室常用,為了擴(kuò)大細(xì)胞產(chǎn)量,將試管改用轉(zhuǎn)瓶,故稱轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng),其培養(yǎng)方法是一樣的,試管或轉(zhuǎn)瓶固定在支加上,傾斜度為5°~10°左右,或?qū)⑥D(zhuǎn)瓶放在一排排轉(zhuǎn)軸之間,使轉(zhuǎn)瓶隨著轉(zhuǎn)軸以每小時(shí)6~12 轉(zhuǎn)緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)。細(xì)胞貼附于玻璃壁四周,細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)只有一個(gè)表面面積,經(jīng)轉(zhuǎn)動(dòng)一方面使培養(yǎng)液流動(dòng),利于細(xì)胞吸收營(yíng)養(yǎng)和進(jìn)行代謝,一方面使細(xì)胞有機(jī)會(huì)接觸氣體,有利于細(xì)胞呼吸和發(fā)生氧化還原作用,有利于細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖。培養(yǎng)瓶(管)內(nèi)保持有相當(dāng)大的上方空間,以維持合適的氧和pH 水平,通過轉(zhuǎn)動(dòng)可使細(xì)胞交替接觸培養(yǎng)液和空氣,營(yíng)養(yǎng)可被充分利用。若需增加細(xì)胞產(chǎn)量,除可在增加轉(zhuǎn)瓶的數(shù)量和容積外,使瓶直徑盡可能小,此時(shí)表面面積可因直徑或長(zhǎng)度的倍增而成倍增加。

轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)也可使用灌注培養(yǎng)系統(tǒng),因此系統(tǒng)需要錯(cuò)綜復(fù)雜回旋的可連續(xù)供應(yīng)的管道進(jìn)入瓶?jī)?nèi),這是一種昂貴的選擇。

[實(shí)驗(yàn)程序]:

本程序是在1400cm2(23×12cm)一次性塑料瓶上使用的(Corning 或Becton Dickinson)程序。

1、加入300ml生產(chǎn)培養(yǎng)液于轉(zhuǎn)瓶中。

2、加入1.5×107細(xì)胞。

3、在37℃下,以12轉(zhuǎn)/小時(shí),轉(zhuǎn)動(dòng)2小時(shí),使細(xì)胞均勻貼壁。

4、減少轉(zhuǎn)動(dòng)速度至5 轉(zhuǎn)/小時(shí)并連續(xù)培養(yǎng)。

5、在倒置顯微鏡下使用長(zhǎng)焦距物鏡檢查細(xì)胞。

6、在細(xì)胞生長(zhǎng)至明顯匯合時(shí)(5~6天),移出培養(yǎng)液,加入0.25%,并滾動(dòng)轉(zhuǎn)瓶以收獲細(xì)胞。洗去,加入新鮮培養(yǎng)基,可轉(zhuǎn)入擴(kuò)大再培養(yǎng)。為了增加表面積,有人將轉(zhuǎn)瓶表面制成帶皺紋的表面或插入多層隔板。以增加表面積。

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