士鋒生物免疫酶細胞化學

時間：2013/12/19閱讀：590

免疫酶細胞化學是免疫細胞化學（Immunocytochemistry,ICC）中zui常用的方法之一，它是在抗原抗體特異反應存在的前提條件下，借助于酶細胞化學的手段，檢測某種物質(zhì)（抗原/抗體）在組織細胞內(nèi)存在部位的一門新技術：即預先將抗體與酶連結，再使其與組織內(nèi)特異抗原反應，經(jīng)細胞化學染色后，于光鏡或電子顯微鏡下觀察分析的形態(tài)學研究方法。
40多年前，Coons及其同事利用熒光色素（fitC）標記抗體而開創(chuàng)的免疫熒光抗體技術，具有一定的靈敏性、特異性、操作簡單等優(yōu)點，但亦存在抗體用量大，標本不能保存、需較昂貴的熒光顯微鏡等問題。幾乎在同一時期，電子顯微鏡在醫(yī)學生物學領域中得到了廣泛的應用。為克服熒光抗體法的不足、并能在超微結構水平定位抗原物質(zhì)的存在部位，Nakane(1966)等成功地引入了酶代替熒光色素標記抗體，進行組織細胞內(nèi)抗原或半抗原的定位，開辟了酶標抗體技術免疫酶細胞化學之路。
Sternberger（1970）等人在此基礎上又作了改良，建立了非標記抗體酶法以及PAP法。酶標抗體法確立至今已經(jīng)27個春秋，不斷發(fā)展、成熟。各種新技術的引入，使新抗體相繼問世，應運而生的抗體制造、經(jīng)銷商遍布世界各地，使ICC技術得到了更廣泛的推廣和應用，成為當今形態(tài)學研究領域中*的手段；同時也有為臨床病理診斷、腫瘤性質(zhì)的判定、預后的估測等提供重要依據(jù)，是臨床實驗室常規(guī)檢查法之一。近年，伴隨分子生物學、分子遺傳學的驚人進步，ICC技術在基因表達產(chǎn)物的觀察，細胞功能動態(tài)分析中，亦發(fā)揮著重要作用。在此，結合，筆者經(jīng)驗，介紹ICC染色中的主要程序：組織標本的固定、切片、染色原理及步驟、結果判定及一些進展、特殊應用等供讀者參考。

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